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999
- 英文名:
pHrodo™ Red和 Green AM 细胞内 pH 指示剂染料
- CAS号:
/
- 保质期:
见瓶身
- 供应商:
麦格生物
- 保存条件:
2-8°C
- 规格:
50μl

使用 pHrodo Red 和 Green AM 指示剂染料(即穿过细胞膜并在非特异性酯酶切割后保留在细胞内空间的荧光探针)测定和定量分析细胞内的 pH 值。pHrodo Red 和 Green AM 指示剂染料在 pH 值下降时荧光逐渐增强,可用于定量分析 pH 值范围为 4–9 的细胞胞质。这些指示剂染料也可用于 HCS、流式细胞分析、微孔板荧光测定和 HCS 应用中的多通路实验。
pHrodo Red(货号 P35372)和 Green(货号 P35373)AM 细胞内 pH 指示剂是用于测定活细胞内 pH 值的荧光探针。它们在中性 pH 值条件下呈弱荧光,但荧光随着 pH 值的下降会逐渐增强。这些试剂可用于定量分析 pH 范围 4–9、pKa ∼6.5 的细胞胞质,其中激发/发射波长为 560/585 nm (pHrodo Red) 或 509/533 nm (pHrodo Green)。
pHrodo Red 和 pHrodo Green pH 指示剂染料均具有光稳定性并适用于多通路实验。pHrodo Red 易于与多种蓝色、绿色及远红色染料和报告基因(如 GFP、Fuo-4、钙黄绿素、NucBlue、CellEvent Caspase 3/7 green、Mitosox Green 和 Mitotracker Deep Red 等)配合使用进行多通路检测。pHrodo Green 易于与多种蓝色、红色和远红色染料报告基因(如 Mitosox Red、CellEvent Caspase 3/7 Red、NucBlue、RFP 和 Mitotracker Deep Red 等)配合使用进行多通路检测。
pHrodo Red 和 Green 染料经 AM 酯基团修饰,可产生一种能渗透细胞膜的不带电分子。一旦进入细胞,染料的亲脂性封闭基团经非特异性酯酶切割,从而产生保留在细胞内空间的化合物。这时探针的荧光强度可指示细胞内的 pH 值。随后使用细胞内 pH 校准缓冲液试剂盒(货号 P35379)定量分析细胞内 pH。
pHrodo Red 和 Green AM 细胞内 pH 指示剂染料与多种平台兼容,例如传统荧光显微镜、高内涵筛选 (HCS)、流式细胞分析和微孔板荧光分析法或高通量筛选 (HTS)。这些试剂也与宽视野或共聚焦荧光显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪和高内涵分析仪兼容。
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文献和实验Chemotherapy-induced pulmonary hypertension: role of alkylating agents. Benoît Ranchoux et al. The American journal of pathology, 185(2), 356-371 (2014-12-17)
between excitation and emission — also responds to pH. The authors used this feature in two-photon microscopy to track second-by-second pH changes in living cells. A red pH sensor leaves the often-used green fluorescence wavelength available for simultaneous
1. 介绍 Ca2+ 浓度([ Ca2+ ] ) 变化涉及细胞过程,如细胞发育、分化和凋亡,在它们存在的时空环境中研究这些变化,可以深入地了解它们的生物学意义。合成染料( 如 Fura 和 Indo) 和发光蛋白(aequorin) 是研究 [Ca2+] 变化的常用工具,但是,多数合成染料迅速从细胞中流失,发光蛋白只有微弱的生物光且不能按比例显示[Ca2+] 的变化[ 1 ] 。相反,蛋白质 Ca2+ 传感器基于 Ca2+- 钙调素复合物和绿色荧光蛋白(起先被命名为钙变色子)克服了原先
5)等。此外还有一些新型荧光染料,如量子点。 (1)异硫氰酸荧光素(FITC):FITC性质稳定,易溶于水和乙醇,能与蛋白质结合,是检测组织细胞内蛋白质最常用的荧光探针。它还能标记抗体,可用于免疫组织化学单染或多重染色。缺点是在光照下易淬灭,易受自发荧光影响。最大激发光波长为490nm;最大发射光波长为525nm,呈现黄绿色荧光。 (2)四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC):该荧光素能与细胞内蛋白质结合,比FITC稳定性好,在生理条件下对pH值变化不敏感,荧光强度受自发荧光干扰小。最大激
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