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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 英文名:
SuperSignal™ West Femto 超敏底物
- CAS号:
/
- 保质期:
见瓶身
- 供应商:
麦格生物
- 保存条件:
4°C
- 规格:
20mL

Thermo Scientific SuperSignal West Femto 超敏底物是一种超灵敏增强型化学发光 (ECL) 底物,与辣根过氧化物酶 (HRP) 配合使用,通过 Western 印迹分析检测低飞克级蛋白水平。
SuperSignal West Femto 超敏底物的特性包括:
•灵敏度:低飞克级
• 稳定性:4°C 下,工作溶液可保持稳定 8 h,试剂盒可保持稳定 1 年
•兼容性:硝酸纤维素和 PVDF 膜
•信号持续时间:长达 8 小时
•推荐的一抗浓度:1:5,000–1:100,000 稀释度 (10–200 ng/mL)
•推荐的二抗浓度:1:100,000–1:500,000 稀释度 (2–10 ng/mL)
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SuperSignal West Femto 超敏底物设计用于通过 Western 免疫印迹分析进行低飞克水平的检测。当与优化的抗体浓度和封闭缓冲液结合使用时,SuperSignal West Femto 底物能够检测到低丰度目标蛋白,即使目标蛋白丰度太低而无法用入门级 ECL 底物观察到。
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文献和实验Spectratyping analysis of the islet-reactive T cell repertoire in diabetic NOD Igμ(null) mice after polyclonal B cell reconstitution.
Allen M Vong et al.
Journal of translational medicine, 9, 101-101 (2011-07-05)
【原创】暗室实验(化学发光底物检测方法)及Western Blot实验优化方法
检测;再次检测结果仍为阴性,证明底物丧失活性。 暗室实验结果阳性: 认为二抗及底物活性良好; Western Blot 系统需要进一步优化 优化抗原和抗体浓度的斑点杂交方法:斑 点 杂 交 方 法——优 化 抗 原 和 抗 体 浓 度 对于一个给定的抗原,最佳的抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力,以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。最优抗原和抗体浓度可通过免疫印迹实验中使用不同浓度的抗原和抗体作用确定。另外,更快和更简单的方法是进行斑点印迹实验。以下是使用超敏感信号底物进行
实验过程: 1. 将SIGMA公司HRP标记的羊抗兔1:10,000开始,5倍稀释。 点1ul到NC膜上,点完后迅速泡到PBS里。 2. 配好发光底物后取出膜,将SuperSignal West Pico与ELC prime 分别加200ul到两块膜上。1min后,在膜表面覆盖塑料膜。 3. 照相 4. 将照相后的膜使用蒸馏水冲洗,然后加入TMB显色底物显色,看两膜显色深浅有无差别。 结果:1. 发光情况 30s结果 1m30s 5m
同时存在的情况下发光,因此特别适合在同一膜上对不同的靶蛋白进行多重检测。目前最高检测灵敏度已达到Femto水平,已成为最安全、最灵敏的WB检测方法。在许多研究者的心目中,ECL几乎已经成为化学发光的代名词,一般含有Luminol、H2O2和发光增强剂等物质。发光试剂中的Luminol被HRP和H2O2氧化产生荧光,荧光被发光增强剂增强。 化学发光常见的问题是抗体的浓度过高,所以抗体的量要比规定的稀释量加大,以保证底物不会因为HRP过量而过快用完,导致结果不稳定。
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