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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海谷研
- 库存:
45
- 英文名:
MBT-2
- 规格:
详见说明书
| 产品名称 | 小鼠膀胱癌细胞多少钱 |
| 种属 | MBT-2 |
| 价格 | 来电可享受优惠 |
资源名称 小鼠膀胱癌细胞
种属:MBT-2
提供形式:T25细胞培养瓶/冻存管
模式菌株:未知
培养方法
培养基:90%RPMI-1640+10%FBS
生长条件:95%空气+5%二氧化碳37摄氏度
生长特性:贴壁生长
存储条件:50% RPMI-1640+40%FBS+10%DMSO 液氮
收到细胞后,在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况:
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。
小鼠膀胱癌细胞多少钱具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。
注意事项:
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
实验材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml灭菌烧杯2个; 人皮肤成纤维细胞,CCC-HSF-1细胞
3、50ml离心筒2个
4、灭菌培养皿1个,细胞培养瓶1个
5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块;
7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;
8、酒精灯1台;
奥卡西产杂质C标准品 英文名称: CAS:
奥卡西产杂质B标准品 英文名称: CAS:
奥卡西产杂质A标准品 英文名称: CAS:
奥平杂质C标准品 英文名称: CAS:174794026
奥平相关物质B标准品 英文名称: CAS:221176494
奥平相关物质A标准品 英文名称: CAS:138564597
昂丹司琼杂质D标准品 英文名称: CAS:99614649
氨地平相关物质A标准品 英文名称: CAS:113994415
氨汀标准品 英文名称: CAS:
氨力农相关物质B标准品 英文名称: CAS:
氨甲环相关物质C标准品 英文名称: CAS:330838523
安非拉盐盐标准品 英文名称: CAS:134805
阿扎红霉素A标准品 英文名称: CAS:16801859
阿扎胞苷相关物质C标准品 英文名称: CAS:
阿昔洛韦相关物质A标准品 英文名称: CAS:102728643
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小鼠膀胱癌细胞多少钱Caspase-5 Activity colorimetric assay Kit产品规格:20T|50T|100T
发货周期:1~3天
本试剂盒适用于测定哺乳动物组织、细胞caspase-5活性。试剂盒测定原理基于Caspase-5特异水解其多肽底物N-acetyl-Trp-Glu-His-Asp-p-nitroanilide(Ac-WEHD-pNA),释放出游离的胺pNA,后者呈黄色在405nm具有大吸收峰,用可见光分光光度比色方法测定,吸光度值对应于Caspase-5的水解活性。
细胞凋亡属于程序化细胞死亡,可见于各种器官和细胞,在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。Caspase-5分子量47.7kD,与ICE有51%的同源性,在过量表达时可诱导凋亡发生。
所需仪器:酶标仪与96孔酶标板;或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。
工作波长:大吸收波长405nm,如不具备也可在400~450nm范围内测定。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
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