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- NEB
- E1603
- 2026年05月29日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
| 品牌 | 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 |
|---|---|---|---|
| NEB | E1603 | phi29-XT RCA（滚环扩增）试剂盒 | phi29-XT RCA Kit |
| 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| E1603L | phi29-XT RCA（滚环扩增）试剂盒 | phi29-XT RCA Kit | 500 rxn |
| E1603S | phi29-XT RCA（滚环扩增）试剂盒 | phi29-XT RCA Kit | 100 rxn |
产品特点
- 使用经过改造的 phi29-XT DNA 聚合酶，可在较短的反应时间内产生较高的产物产量，并具有更好的热稳定性和灵敏度
- 扩增可从低至 1 fg 的环状 DNA 起始
- 灵活的操作方案适用于不同类型的起始样本
- 实现多种下游应用，无需进一步的处理步骤
- 试剂盒包含 dNTP 和外切酶抗性随机引物
- 如有需要，请观看使用经过改造的 phi29 DNA 聚合酶增强滚环扩增性能 NEB TV 网络研讨会
phi29-XT RCA（滚环扩增）试剂盒包含了灵敏高效实现滚环扩增（RCA）所需的全部试剂，这是一种等温扩增方法，通过产生环状序列的长重复拷贝来连续扩增环状 DNA。该试剂盒的特点是包含 phi29-XT DNA 聚合酶，该酶是经基因工程改造过的聚合酶，相较于野生型 phi29 DNA 聚合酶，可在更短反应时间内获得高产量的产物，并改善热稳定性和灵敏度。该试剂盒还包含 dNTPs 和核酸外切酶抗性的随机引物（含有硫代磷酸酯键），确保了扩增环状 DNA 序列的通用性。起始材料可以是纯化的环状 DNA（单链或双链），或者直接使用液体培养基培养物、琼脂平板菌落和甘油菌，而不需要额外进行 DNA 提取。RCA 产物可直接用于下游应用，如 DNA 测序、细胞游离 DNA 富集、无细胞蛋白表达和 DNA 生物传感器。
备注：以上仅为 E1603 的部分产品信息，如需NEB货号 E1603 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等，请通过NEB官网查找对应的货号获取。
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文献和实验DNAterminiconcentrationof0.12μM,300-μg/ml)inatotalreactionvolumeof20μlin30minutesat16°Cin1XT4DNALigaseReactionBuffer. 储存缓冲液成分: 10mMTris-HCl 50mMKCl 1mMDithiothreitol 0.1mMEDTA 50%Glycerol pH7.4@25°C
后通过加热可以是蛋白失活，从而不需纯化便可以进行连接反应。 4.XbaI是典型的dam甲基化敏感内切酶，您可以分析您的载体序列，看是否是甲基化敏感，如果是甲基化敏感，那么您的载体肯定切不开，可以有两种解决方案：A.用甲基化缺陷型菌株转化提取质粒之后再做酶切,NEB有免费赠送的甲基化缺陷型菌株；B.可以用phi29DNA聚合酶进行链置换反应，再进行酶切就可以切开了。 qingchagood wj1989113 wrote:
buffer (Epicentre Technologies) 100 U/µl RepliPhi phi29 polymerase (Epicentre) 10× NEBuffer 4 (NEB
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