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北京柏瑞图科技有限公司
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MMD-41-02-204-10ml
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文献和实验once with 20 ml Pbs transfer to 2 ml Eppendorf tube, wash again with Pbs and freeze cells or proceed on resuspend in 200 - 400 µl CHIP lysis buffer , add an equal volume of glass beads shake for 30 min at 4 °C on vortexer (maximum
Steady State ATPase Assays Coupled Enzyme System
. 5. Make Tris-MgCl2 -DTT mix for all assays. Tris-MgCl2 -DTT mix = (n = # of assays + 1) n x 20 µL 0.5 M Tris-OAc, pH 7.5 20 µL 10 mM MgCl2 20 µL 10 mM DTT 70 µL DDW
Single Primer ("Semi-Random") P
to about 1 ng/µL 3 µL "T/TS" @ 0.4 u Taq/µL -------- 30 µL Cycle as follows: 30"x94°C 20 cycles 0"x94°C 0"x55°C 1'x72° S=9 30 cycles 0"x94°C 0"x40°C 1'x72° S=6 30 cycles 0"x94°C 0"x55°C 1'x72° S=9 Clean up: Add 1 µL ExoI
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