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文献和实验RUVKUN Antibody Staining Protocol revised 10/29/90
from O2 pressure. Wash once with BO3 buffer and once for 15 min. or more with Antibody Buffer B: 9. Store worms in Antibody Buffer A: 10. Incubate a small aliquot of worms in 10ug/ml RNAse A, 1 hour, 37 C. Stain RNAsed and unRNAsed aliquots (small
antibody: Anti-mouse IgG-Alkaline Phospphatase Buffers Lysis buffer: 100ml 50 mM Tris-Cl, pH 8.0 0.6057g 150m M NaCl 0.8766g 0.02%NaN3 0.02g 100ug/mlPMSF 0.01g 10ug/ml Aprotinin 0.001g 1% Triton X100 1g 2x SDS-loading buffer: 100ml 100 mM Tris
要设立对照。该法可用于多样本、多位点甲基化的检测，样本需要量少，适于临床样本，但存在假阳性问题。 2.2.11 甲基化敏感性斑点分析（methylation sensitive dot blotassay，MS-DBA） G Clément等2005年[43]报道了一种新的方法，能够定量或半定量分析样本中的甲基化水平。这个方法的过程是：先用重亚硫酸盐处理待测DNA片段，随后以非CG区的引物行PCR扩增，将扩增产物变性后转移到尼龙膜上，用3'端DIG标记的含有2个CG（或TG）的双核苷酸探针与DNA
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