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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 检测范围:
详询
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
科研实验
- 适应物种:
人
- 标记物:
详见说明书
- 样本:
血清,血浆及相关液体样
- 规格:
48T/96T
产品全称:人磷酯酰肌醇特异性磷酯酶C(PIPLC)ELISA试剂盒
英文全称:Human phosphoinositide-specific phospholipase C,PIPLC ELISA试剂盒
产品特点:灵敏度高、特异性好、稳定性好、批间差小、操作方便省时、价格合理
产品说明:可联系我司免费获取产品说明书
★elisa试剂盒可测种属:人、大鼠、小鼠、猪、兔、犬、猴、牛、羊、马、豚鼠、鸡、鸭等相关种属。
★elisa试剂盒可测样本:测定血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织和相关液体样本中的含量或者活性等。
★适用范围:仅供科研使用
★检测类型:双抗体夹心法测抗原、双抗原夹心法测抗体、间接法测抗体、竞争法测抗体、捕获包被法测抗体、ABS-ELISA法
★检测原理:免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应,以前用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原,而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多克隆抗体和使用杂交瘤技术得到的单克隆抗体,而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。
人磷酯酰肌醇特异性磷酯酶C(PIPLC)ELISA试剂盒常见问题以及解决方法(仅供参考):
1、试剂的选择:选择优良试剂大家都是知道的,但是在检测之前还应该提前半个小时将试剂拿到常温下进行解冻;
2、加样中可能遇到的问题:在做血清或是血浆用于检测试剂的时候,会碰到血清血浆不好分离的情况,这个时候的解决办法最好是先放在常温中1到2小时,然后在进行离心处理;
3、洗板时容易造成误差: 因为洗板是人工洗的,所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的,这个时候带有主观色彩,所以最好多清洗几次,还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动;
4、显色问题: 使用了过期的显色剂或者是显色剂用过后放置时间太长,都有可能造成显色剂不显色。所以在进行显色反应的时候,要先查看显色剂本身的情况;
5、终止反应:在加终止剂的时候由于倾倒速度快,差生气泡,造成假阳性结果。所以在倒终止剂的时候要缓慢倒;
6、读板:读板的时候首先应该保证板的清洁干净;
7、严格按照人磷酯酰肌醇特异性磷酯酶C(PIPLC)ELISA试剂盒说明书操作。
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文献和实验饥饿的 HeLa 和 NIH 3T3 癌细胞系获得的裂解物中的磷酸化蛋白特异性。图示:从复杂生物样品中富集高纯度磷蛋白。用 theThermo Scientific Pierce 磷酸化蛋白富集试剂盒进行 Weste blot 分析,根据试剂盒说明书制备细胞裂解液,富集磷酸化蛋白。利用识别生长因子信号传导相关关键调控蛋白的磷酸化特异性抗体实现蛋白检测。细胞色素 C (pI 9.6) 和 p15Ink4b (pI 5.5) 作为非磷酸化蛋白非特异性结合的阴性对照。FT = 流穿馏分,W = 合并洗脱馏分,E
这既与其较高的灵敏性有关亦与其较低的特异性有关。为证实此点我们作了进一步研究,结果发现TUNEL凋亡检出率与Annexin V/PI中凋亡+死亡检出率无显著差异,相关分析亦提示TUNEL凋亡检出率实际更能反映凋亡+死亡检出率。 1992年Fadok 报道在细胞凋亡早期位于细胞膜内侧的磷酯酰丝氨酸(PS)迁移至细胞外侧[4] 。1995年Vermes利用对PS有高度亲合力的磷脂结合蛋白Annexin V检测凋亡细胞。由于坏死细胞PS亦暴露于外表使Annexin V结合
灵敏性。但该法最大缺点是坏死细胞亦呈现TUNEL反应阳性,使其特异性降低[3] 。本研究TUNEL凋亡检出率为50.17%,显著高于其它二法。我们认为这既与其较高的灵敏性有关亦与其较低的特异性有关。为证实此点我们作了进一步研究,结果发现TUNEL凋亡检出率与Annexin V/PI中凋亡+死亡检出率无显著差异,相关分析亦提示TUNEL凋亡检出率实际更能反映凋亡+死亡检出率。 1992年Fadok 报道在细胞凋亡早期位于细胞膜内侧的磷酯酰丝氨酸(PS)迁移至细胞外侧[4] 。1995年Vermes利用
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