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联硕生物
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联硕生物是一家专业经营生物、仪器、试剂、耗材的公司,在广大客户的支持及公司全体员工不懈的努力下,公司的服务和业务网络已遍及全国,成为了国内生命科学领域产品的主要供应商之一。自成立以来,联硕生物一直秉承客户至上、服务至诚;诚信为本的理念,致力于做靠谱放心的专业服务商,助力您的科研成就!
主营品牌:Sigma、Amresco、santa、hyclone、PeproTech、ABcam、life、Axygen、Corning、AMEKO、Merck、promega、GE、nunc等
主营产品:
试剂盒:ELISA试剂盒、免疫组化试剂盒、分子生物学试剂盒、细胞凋亡试剂盒
细胞培养:血清,专业培养基,常用传统培养基
耗材:进口、国产细胞培养耗材、普通实验耗材
生化试剂:原装进口生化试剂、进口分装生化试剂、国产生化试剂
抗体:进口原装抗体、进口分装抗体、单克隆抗体、多克隆抗体、一抗、二抗等
联硕生物(上海-浙江)
公司官网:www.biolianshuo.com
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文献和实验Cell Lysis/Western/IPSteven Finkbeiner,Departments of Neurology and Physiology,UCSFcompiled by 6/95 by AJS from AB)Fresh 1X LysisFresh 1X LysisFinal5ml10ml2X Lysis 2.5 ml5mlNaCl0.25M0.25ml of 5M0.5 ml of 5MNa3VO40.1mM25l (μl) of 200 mM5l (μl) of 200
其他方法验证更详细的相互作用信息。 图 11:使用抗体进行 Co-IP 与使用 Strep-Tactin®XT 进行pull-down 融合蛋白沉降 pull-down IP 和 Co-IP 通过固定抗体来捕获诱饵蛋白质及其结合分子,而 pull-down 可使用带亲和标签的目的蛋白进行,在体外验证蛋白间的直接相互作用。Pull-down 是通过磁珠/琼脂糖填料固定带有标记的「诱饵」蛋白,从细胞裂解液、纯化蛋白或表达系统中捕获「猎物」蛋白,然后将复合物蛋白分离后进行凝胶或质谱分析,从而确认互作
或者互作蛋白复合物(红色+黄色)洗脱 Step 5:分析检测—Western Blot 或者质谱 常用“黑话” 以上示例图证明了 EDR1 和 EDR4 有相互作用。如果想要设计好实验,先清楚以下常用“黑话”含义。 阳性对照:证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白(IP)或者互作蛋白对(co-IP,比如诱饵蛋白X和靶蛋白 Y),即为常说的 input。可直接取抽好的蛋白溶液进行 Western。 阴性对照:用来排除假阳性。IP/co-IP 后靶蛋白或者互作蛋白对都检测到了,固然是值得高兴
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