在小鼠中产生的单克隆抗StrepTag抗体

高效液相色谱纯化小鼠腹水中单克隆抗体

从小鼠腹水中纯化mcab的方法有盐析、离子交换层析、凝胶过滤和亲合层析等。应用tsk deae-spw离子交换层析柱从小鼠腹水中纯化mcab不仅纯化速度快，回收率和得率高，而且保持良好的生物学活性。一、原理根据离子交换原理，将经硫酸铵粗提的含mcabγ球蛋白上样结合于层析柱上，通过增加洗脱液中的离子强度，洗脱并收集蛋白峰。二、试剂和器材1、tsk deae spw离子交换层析柱（75mm×7.5mm，bio rad）2、高效液相色谱仪（包括控制系统、溶剂传递系统、高压加压活门和紫外280nm

单克隆抗体研究中实验动物的选择与应用

地把两种细胞融合在一起，一种是已适应体外培养的小鼠骨髓瘤细胞（都来自BALB/C品系的小鼠）和一种经绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞融合，形成杂交细胞，发现这种融合的杂交细胞兼有两个亲代细胞的特征，即既有骨髓瘤细胞无限生长的能力，又有浆细胞合成单一抗体的能力。因此，这种免疫细胞通过克隆化，成为单克隆系（单一纯化的无性繁殖细胞系），就能产生大量单一类型的高纯度抗体，这种抗体就叫作“单克隆抗体”，如果把杂交细胞再种入动物体内，可形成“杂交细胞瘤”，瘤子产生大量抗体，就可以从动物体液中抽出含有单克隆抗体的体液

　单克隆抗体研究中实验动物的选择与应用--单克隆抗体技术与实验动物关系

技术是在1975年由Kohler和Milstein首创的，他们在60年代发展起来的细胞杂交技术的基础上，成功地把两种细胞融合在一起，一种是已适应体外培养的小鼠骨髓瘤细胞（都来自BALB/C品系的小鼠）和一种经绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞融合，形成杂交细胞，发现这种融合的杂交细胞兼有两个亲代细胞的特征，即既有骨髓瘤细胞无限生长的能力，又有浆细胞合成单一抗体的能力。因此，这种免疫细胞通过克隆化，成为单克隆系（单一纯化的无性繁殖细胞系），就能产生大量单一类型的高纯度抗体，这种抗体就叫作“单克隆抗体”，如果把杂交