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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
人
- 细胞类型:
肿瘤细胞
- 肿瘤类型:
详见操作说明
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 库存:
大量
- 英文名:
U-937-LUC
- 生长状态:
悬浮生长
- 年限:
详见操作说明
- 运输方式:
常温/干冰运输
- 器官来源:
人
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
单核细胞
- 免疫类型:
详见操作说明
- 物种来源:
人
- 相关疾病:
详见操作说明
- 组织来源:
淋巴瘤
- 规格:
株
U-937-LUC细胞(人组织细胞淋巴瘤细胞-荧光素酶标记)
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一、细胞基本属性 |
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细胞名称 |
U-937-LUC细胞(人组织细胞淋巴瘤细胞-荧光素酶标记) |
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细胞别称 |
U-937-LUC |
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商品货号 |
ZY-C6029H-L |
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种属来源 |
人 |
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年龄性别 |
- |
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组织来源 |
淋巴瘤 |
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生长特性 |
悬浮生长 |
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细胞形态 |
单核细胞 |
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背景简介 |
- |
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生物安全等级 |
- |
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细胞规格 |
1×10^6cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装 |
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支原体检测 |
无 |
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培养基 |
RPMI-1640+10%FBS+1%P/S |
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培养条件 |
气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ |
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冻存条件 |
无血清冻存液,液氮储存 |
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倍增时间 |
~24-30小时 |
二、细胞接收后的处理
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于室温放置约1h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2) 离心管直接在1000RPM条件下离心5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞后,根据离心后的沉淀量进行传代,转移至T25培养瓶中后,请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:传代时使用【半换液法】对细胞状态有利,因此我库建议您使用【半换液法】进行传代,刚收到细胞时建议1:2传代较为合适。
4) 备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。
三、细胞培养操作
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含8mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
【半换液法】
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×106个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。
【离心换液法】
如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a) 收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b) 根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度1×10^6~1×10^7/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c) 将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
四、培养注意事项
1) 细胞出现问题,予以重发情况
a) 细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;
b) 细胞污染问题,请在收到产品3 天内,给我们提出真实的实验结果,核实后重发;
c) 常温发货的细胞静置2小时后,干冰冻存发货的细胞复苏后2 天后,绝大多数细胞未存活,(需提供真实清晰的细胞状态照片),重发;
d) 干冰冻存发货的细胞复苏后2天后或常温发货的细胞静置2 小时候并且未开封,出现污染,重发;
e) 细胞活性问题,请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,和每天的细胞照片,核实后予重发;
f) 细胞收到当天以及第2,3 天请拍照,3 天未告知的,视为产品合格。4-7 天内出现问题需提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题的照片以及细胞相关操作的详细步骤,并跟技术人员沟通的,由技术人员判定为我方责任的,重发。
2) 细胞出现问题,不予以重发的情况
a) 客户操作造成细胞污染,不重发;
b) 客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发;
c) 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
d) 细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3 天的细胞状态照片,不重发;
e) 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发;
f) 收到细胞并发现问题与客服人员沟通的时间证明大于7 天的,不重发;
g) 视具体情况而定
五、注意事项
1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。
该细胞仅供科研使用!说明书仅供参考以实际到货说明书为准!
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文献和实验量筛选。自从20多年前,Marlene DeLuca's第一个成功的获得表达萤火虫荧光素酶基因(luc基因)的转基因烟草以来,生物发光的应用进入了一个新时代。生物发光和化学发光(BL/CL)的主要特点就在于发光信号的高度可测性,可以用PMT(光电倍增管)和CCD成像系统来检测极少量的光子信号。BL是属于CL范畴之内,CL反应的特点是高光子产生效率,BL为05-0.8 ,CL为0.1-0.001。因此BL/CL的检测极限可以达到10-18到10-21摩尔,这显然要比其它的光学技术强的多。BL/CL已经
的单个细胞吗? 可以检测到流体的细胞,只要细胞总数达到100以上。我们可以提供许多文章,其中用荧光素酶标记了T细胞,NK细胞,造血干细胞和其他淋巴细胞。在这些标记的细胞总数达到一百以上时,我们的仪器可以观察到信号(见上篇关于T细胞的索引)。IVIS 200的体外检测可以观察到单个细胞。 可以用该技术研究基因表达吗? 可以。研究基因表达可以从影响基因表达的各个不同的层面进行相关的研究,如利用融合蛋白(p27-luc融合蛋白研究其在Cdk细胞分裂周期的表达Nature Medicine 2004
人骨髓性的白血病RPMI-1640, 10% 胎牛血清U937淋巴样人组织细胞淋巴瘤RPMI-1640, 10% 胎牛血清KG-1骨髓白细胞人红白血病病人骨髓IMDM, 20% 胎牛血清McCoy成纤维细胞小鼠未知MEM, 10% 胎牛血清BALB/3T3成纤维细胞小鼠胚胎DMEM, 10% 胎牛血清3T6成纤维细胞小鼠胚胎DMEM, 10% 胎牛血清A9成纤维细胞小鼠结缔组织DMEM+10% 胎牛血清+6-硫鸟嘌呤(30μg/ml)+2,6-二氨基嘌呤(30μg/ml)AtT-20上皮细胞
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