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英文名称:Honda Toxin-Producing Broth Base
规格:250g
Honda氏产毒肉汤基础产品说明与用途:用于致泻大肠埃希氏菌的产毒培养(GB标准)
Honda氏产毒肉汤基础使用操作规程:
目的:建立营养琼脂培养基配制使用操作规程。
范围:本操作规程适用于营养琼产品脂培养基的配制使用。
职责:质检室质检员负责本操作规程的执行,质保室质监员负责本操作规程的监督检查。
本文由Honda氏产毒肉汤基础生产厂家上海哈灵生物科技有限公司提供 www.sh-haling.com
Honda氏产毒肉汤基础实验内容:
1.仪器与试剂:
1.1.托盘天平、消毒锅、电实验冰箱、1000ml三角瓶、500ml量筒、玻璃棒、棉塞、牛皮纸、线绳、培养皿。
1.2.蒸馏水、营养琼脂、75%酒精。
2.操作方法
2.1.称取营养琼脂17克,于1000ml三角瓶内,加入500ml纯化水,充分搅拌后,塞上棉塞,用牛皮纸包好,扎紧瓶口。
2.2.置消毒锅内,于115℃高压灭菌30分钟,取出放置至室温后,放入实验冰箱,备用(实验冰箱温度控制在1-4℃)。
2.3.使用时从实验冰箱取出,放置室温后,置水浴中加热,使融,全部融化后取出,放置约45℃时使用。
2.4.使用时,用75%乙醇擦瓶子外围,打开牛皮纸包扎外壳,在火焰附近慢慢旋下棉塞,左手拿培养皿,右手拿三角瓶,慢慢倾倒至培养皿中,每皿注入约
15ml完毕后,将棉塞在火焰上方烧烤数秒,立马塞入瓶口,包上牛皮纸外层,用线绳扎好,留下次使用。(此瓶培养基只允许使用两次,且每次首先倾注一个空白平皿作为对照培养)。
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文献和实验成分 水解酪蛋白 20g 酵母浸膏粉 10g 氯化钠 2.5g 磷酸氢二钠 15g 葡萄糖 5g 微量元素 0.5mL 蒸馏水 1000mL pH7.5 制法 溶解后校正pH,高压灭菌121℃ 15min,待冷至45~50℃时,加入林可霉素溶液,每毫升培养基内 含90μg。 微量元素配方 硫酸镁 5g,氯化铁 0.5g,氯化钻
水内,校正pH。将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内,分别灭菌121℃ 15min,将两液混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内。注:在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于1d内发酵。 56 CAYE培养基此培养基附在肠毒素诊断试剂盒内,如无此培养基,亦可用Honda氏产毒肉汤。 57 Honda氏产毒肉汤成分:水解酪蛋白 20g酵母浸膏粉 10g氯化钠 2.5g磷酸氢二钠 15g葡萄糖 5g微量元素 0.5mL蒸馏水 1000mLpH7.5制法:溶解后校正pH,高压灭菌121℃ 15min,待冷至45
溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL 蒸馏水 100mL pH7.4 制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸馏水内,校正pH。将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内,分别灭菌121℃ 15min,将两液混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内。 注:在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于1d内发酵。 56 CAYE培养基 此培养基附在肠毒素诊断试剂盒内,如无此培养基,亦可用Honda氏产毒肉汤。 57 Honda氏产毒肉汤
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