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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
上海三抒生物科技有限公司
- 检测范围:
见说明书
- 检测方法:
酶联免疫法
- 应用:
科研实验
- 适应物种:
见说明书
- 标记物:
咨询客服
- 样本:
血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被维生素D(VD)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的维生素D(VD)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
2.自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
上海三抒生物科技有限公司是一家从事于生物化学行业的企业,公司致力于为实验室分析领域提供一站式服务,为用户提供专业、快捷、可靠的全方位服务。
公司 能为广大用户提供各种技术平台服务。我们提供的产品主要有:生化试剂(elisa试剂盒、生化试剂盒)、通用试剂、抗体、细胞、中间体、培养基、对照品/标准品、实验室耗材等,同时我司能以优惠的价格为您提供各种进口的生物化学试剂、抗体以及分析仪器等。
上海三抒生物科技有限公司将一直致力于生物、化学、医药、精细化工、食品工业、现代农业、地质矿产、生命科学、环境保护、疾病控制、新能源等领域的长远发展,一如既往地秉承“专业的”服务精神,“真诚的”服务理念和“客户至上”的服务宗旨,更好地服务于全体用户,为用户提供性价比最高的产品和最专业的技术服务!
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文献和实验用蛋白或多肽标签融合于重组蛋白中,进而方便重组蛋白的纯化和检验。小分子标签通常免疫原性较低,且不影响目标蛋白功能而得以保留。但是大分子标签如 GST 因其对目标蛋白的结构和生物活性有所影响,通常需要去除。 今天我们就来聊一聊柱上酶切那点事儿~ 什么是柱上酶切 柱上酶切纯化路线是指在吸附了标签蛋白的层析柱上添加蛋白酶进行在位去除标签,具有更加灵活、高效、快速的特点。 相比于常规的洗脱后的酶切纯化路线,柱上酶切不仅可以简化酶切后的再次上样操作,同时可以尽量避免操作过程中目标
。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素膜NC膜 )上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。其图解为: Western Blot显色的方法主要有以下几种: i. 放射自显影 ii. 底物化学发光ECL iii. 底物荧光ECF iv
的 O-连聚糖的糖蛋白 [14,15 ] 。这些细胞核蛋白是否为 SPIN-DLY 和 SEC 的底物仍是个谜。 1.3 糖基化的异质性 真核细胞的成熟分泌糖蛋白 N-糖基化模式是内质网中的寡聚糖共翻译转运过程和其在内质网和高尔基体内加工的共同结果。多肽折叠因子会影响内质网内潜在糖基化位点 [16] 。结果导致蛋白质中的多个 N-糖基化位点中有些位点为无效糖基化位点,其他一些则未能完全糖基化 [17~19] 。 同时,多糖侧链的修饰加工与其是否接触到成熟的酶相关。虽然被包被在蛋白
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