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SW1990_人胰腺癌细胞

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  • ¥1500
  • ScreeNingBio
  • 上海
  • SNB-TC-0972
  • 2026年02月15日
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    • 详细信息
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    • 库存

      100

    • 供应商

      格宁生物

    • 细胞类型

      肿瘤细胞

    • 组织来源

      胰腺

    • 相关疾病

      胰腺癌

    • 物种来源

    • 细胞形态

      上皮细胞样

    • 是否是肿瘤细胞

    • 运输方式

      常温或干冰

    • 生长状态

      贴壁生长

    • 规格

      T25

    SW1990_人胰腺癌细胞

    产品信息

    细胞名称SW1990_人胰腺癌细胞

    种属来源:

    性别年龄: 男性,56岁

    组织来源: 胰腺

    生长特性: 贴壁生长

    细胞形态: 上皮细胞样

    培养条件: Leibovitz's L-15 Medium+10% fetal bovine serum37, 5% CO2

    细胞规格: 1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

    传代方法: 1:3传代,2-3天传1代

    冻存条件90% FBS + 10% DMSO

    细胞培养操作

    干冰运输收到细胞后需立即转入液氮保存、或者-80°C冰箱短期冻存、或者直接复苏

    常温运输收到细胞后,请立即将细胞培养瓶从包装盒中取出,并按照下方操作步骤进行培养传代

    细胞传代细胞密度达80% - 90%,即可进行传代培养

    培养瓶中细胞操作步骤

     对于贴壁培养的细胞,寄送前,我们会将培养基充满整个培养瓶,以减少产品运输过程中贴壁细胞的脱落。

    1.     收到细胞后,请注意观察是否有污染。将培养瓶置于倒置显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。因为运输过程中存在颠簸,且有些细胞对温度变化也很敏感,可能存在一些细胞脱落漂浮的情况,这些细胞仍是活细胞,请勿丢弃,可离心富集后传代使用。

    2.     对于贴壁细胞,在生物安全柜环境中,用真空泵去除培养瓶中多余的培养基,至剩余5-8mL 左右,随后根据培养基选择合适的CO2含量的37℃恒温培养箱中培养,拧松瓶盖。如果细胞已经长满培养瓶,请立即传代。

    3.     对于悬浮的细胞,在生物安全柜环境中,转移培养瓶中的细胞至离心管,150 g 离心 5 分钟,去除上清后,用5 mL培养基吹散细胞,转移至新的培养瓶中,随后置于合适的CO2含量的37℃恒温培养箱中培养。

    冻存管细胞操作步骤

    注意: 为保证细胞的高活率,请收到产品后,立即解冻培养。

    1.     将冻存管置于37℃水浴中来回晃动,迅速解冻。为避免污染,确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速,大约1分钟。

    2.     一旦冻存管中液体融化后,立即取出,采用酒精喷拭冻存管表面。从此步开始,后续操作须在生物安全柜中完成。

    3.     将冻存管中的液体转移到含有5mL完全培养基的离心管中,150 g 离心 5 分钟,用真空泵去除上清。

    4.     用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率,请将培养基在37℃水浴预热后使用。

    5.     将细胞置于含有合适CO2的37℃恒温培养箱中培养。

    贴壁细胞传代培养

    1.     吸取并弃掉培养瓶中培养基,加入PBS润洗一次。

    2.     加入1 mL 0.25 (w/v) Trypsin-EDTA 溶液,并置于37℃培养箱中孵育,直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3-5分钟。

    3.     加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶,并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落,并使细胞分散。

    4.     将细胞悬液收集到15mL离心管里,150 g 离心 5 分钟,用真空泵去除上清。取适量的培养基将细胞重悬,转移到新的培养瓶中培养。

    悬浮细胞传代可参考以下方法:

    一、直接传代法

    1.       待悬浮细胞长满至 80%~90%(细胞悬液变黄),即可传代;

    2.       吸管吸弃细胞悬液 1 / 2~1 / 3;

    3.       加入适量的新鲜培养基,继续培养。

     二、离心传代法(在发现有细胞碎片的情况下)

    1.       将细胞悬液转移到离心管内;

    2.       150 g 离心 5 min,弃去上层清液;

    3.       使用新鲜的培养基重悬细胞;

    4.       吸管吸取适量细胞悬液,装入新的培养瓶,再加入适量的新鲜培养基,继续培养。

    细胞冻存操作

    1.       1000rpm离心5分钟去掉上清。加1 mL血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1 x 106/mL,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识;

    2.       将冻存管置于程序降温盒中,放入-80°C冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。

     

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