人肺癌腺癌细胞

【求助】构建人肺癌细胞的cDNA文库

littleyan0418 我现在的任务是要构建人肺癌细胞的cDNA文库，但我不是这个方面科班出身，好多地方还不是很明白，想请教师兄师姐的经验，应该注意些什么。现在对总RNA的提取我有点找不出头绪。麻烦师兄师姐们可以给我分享些这方面的资料和网址吗？非常感谢！！ neuronboy http://www.takara.com.cn/ 价格、试剂盒和说明书都有。呵呵 littleyan0418

腺癌细胞的分化后形态

涂片中腺癌（adenocarcinoma）分为分化较好的和分化差两种亚型。 1.分化较好的腺癌细胞：癌细胞体积较大，呈圆形、卵圆形、成排脱落者可呈不规则的柱状。胞质丰富略嗜碱染色，。胞质内可见粘液空泡，呈透明的空泡状，有的空泡很大，核被挤压在一边呈半月状，称为印戒细胞。医学教育|网搜集整理有时在胞质内见到圆形细胞围腺样结构。癌细胞核为圆形或卵圆形、略畸形，染色质丰富，略深染，呈粗块或粗网状，核边不规则增进取，常见1-2个增大核仁直径是可达3-5μm.胞质核常偏于癌细胞的一侧

人肺癌细胞（spc-A1、NCI-H446）传代

都是贴壁细胞，在消化传代过程中，步骤如下：倒尽旧的培养液－＞用无血清的培养基清洗一两次－＞加入一定量的胰酶，置于37度培养箱中5--10分钟，使细胞悬浮－＞显微镜下观察，待细胞大部分变圆时，回到超静台－＞加入一定量的含血清的新培养液，以终止胰酶作用－＞反复吹打细胞－＞再置显微镜下观察，直到细胞全部悬浮起来－＞吸出一部分加入新的培养瓶中－＞最后再补充加入一定量新的培养液。注意：　1、吹细胞时尽量多吹边角儿，此处细胞生长的多。2、吸出细胞前要混匀，可以剧烈震荡培养瓶。3、我们用的是DMEM