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1×10⁶cells/T25培养瓶
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文献和实验Raji是人Burkitt's淋巴瘤细胞,是 CAR-T、NK 细胞杀伤、B 细胞受体信号、补体依赖细胞毒及免疫炎症通路研究的经典悬浮工具细胞。细胞天然聚团、对血清、细胞密度和机械吹打均高度敏感,状态极易受环境、操作、血清质量影响,本文将针对Raji的细胞培养流程进行梳理和指导。 一、细胞复苏 1.【准备工作】水浴锅提前预热至 37℃;准备 9ml 培养基在37℃条件下预热;生物安全柜提前使用紫外照射 30min; 2.【融化】从液氮取出冻存管,37℃水浴快速摇晃融化,约 1-2
[6]。以CD20作为治疗B淋巴细胞瘤的理想靶点具有很好的选择性。HI47(IgG3)是我所于1990年研制成功的国内第一个抗CD20鼠源性单克隆抗体,第四届国际人类白细胞分化抗原会议将HI47命名为CD20+X[7]。我们利用噬菌体显示技术克隆到HI47可变区基因,利用该基因构建了嵌合抗CD20 Fab片段,并在大肠杆菌中可溶性分泌表达[8],本研究旨在研究抗CD20 Fab抗肿瘤活性的机制。一、材料与方法1、材料PI为Sigma公司产品;3H-UdR购于中国原子能研究所;Raji细胞为我室所存,用含小牛
因为抗体的结合而减少;在人体血清中无游离的CD20存在;最重要的是B淋巴细胞瘤上的CD20少有内吞和脱落的发生[ 2-5 ] 。1997年,以CD20为靶点的嵌合抗CD20单克隆抗体Rituxan已获准应用于B细胞淋巴瘤的治疗[ 6 ]。HI47(IgG3)是我所于1990年研制成功的国内第一个抗CD20鼠源性单克窿抗体,第四届国际人类白细胞分化抗原会议将HI47命名为CD20+X[ 7 ] 。我们利用噬菌体显示技术从HI47杂交瘤细胞中克隆到抗CD20抗体HI47可变区基因,将该基因构建成为嵌合的抗
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