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文献和实验性起调节作用。很多凋亡的关键步骤包括caspase激活物的释放和电离子通道的改变,以及线粒体膜电位差的丢失等都发生于线粒体,因此线粒体 对凋亡的发生或抑制起重要作用。 (一)细胞色素C释放与凋亡复合体的形成 在研究哺乳细胞凋亡的生物化学反应时,发现某些位于线粒体内膜的蛋白可以直接启动细胞凋亡,并导致细胞色素C释放到细胞质或细胞核。被释放的细胞色素C可以和Apaf―1结合,改变其构象,大大增加后者与dATP/ATP的亲和性,并且使细胞色素C―Apaf―1形成多聚体。与此
理想的期望是通过增加一些步骤,使得样品中最终只含有 0.2% ~1% 的非线粒体蛋白质污染,如利用细胞器表面所带电荷或亲和捕捉技术。但是这些都还不常用。 ( 8 ) 在分离外膜/膜间隙与沉淀时使用的低渗溶液中蔗糖的浓度取决于不同的材料。这种渗透势可以在 10~80 mmol/L 变化以确定最适浓度,从而保证外膜最大程度的破裂 ,而内膜最小程度的破裂。 参考文献 1. Neuburger, M. (1985) in Higher-Plant Cell Respiration
XXXX原代细胞干预培养与激光共聚焦蛋白细胞定位实验 实验试剂:PBS(磷酸盐缓冲液pH7.4)(实验室常规配置);非免疫山羊血清;Triton X-100(sigma);BSA抗体稀释液(实验室常规配置);A蛋白抗体(Santa cruz);B蛋白抗体(Abcam);Alexa Fluor® 488 donkey anti-goat IgG (H+L)(Invitrogen);Alexa Fluor® 555 Anti-Rabbit IgG (H+L), F(ab
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