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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 保质期:
2年
- 英文名:
CMV Open System PCR Reagents
- 库存:
100
- 供应商:
asnail
- 规格:
24 Reactions///64 Reactions
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文献和实验模块不匹配造成重复孔间差异 3)使用了质量比较差的耗材 Applied Biosystems™ 系列的荧光定量 PCR 仪器是一个开放的平台,客户可以使用开放的试剂、开放的耗材。但是目前市面上荧光定量 PCR 耗材种类繁多,质量也是良莠不齐,在耗材选择上尽量选择质量、品牌好一点的,切莫因为便宜选用质量很差或不符合要求的耗材,否则会引起一系列问题,引来实验的困扰,造成不必要的时间、精力和试剂、样本的浪费。比如质量不好的耗材可能会引起荧光值不稳定,这会造成反应孔的自动基线扣除错误,得到不准确的 CT 值(图
许多用户在做荧光定量 PCR 实验中,总会向我们来电咨询:荧光定量 PCR 需要跑到平台期才准确?我的扩增曲线没有平台期,是不是使用的试剂不好?是不是扩增失败了?也有些用户会通过增加 PCR 循环数来实现平台期,这种做法是否可取呢?下面我们将以一组对比实验为例来看看平台期到底是否会影响定量结果,又有哪些因素会影响到扩增曲线的平台期呢? 来看一个典型的例子(图 1),这是一组 6 个梯度稀释的标准品,扩增曲线指数期之后是漫长的线性扩增期,直到循环结束也没有出现明显的平台期。这样的结果能否得到理想
度的检测手段对实验过程中的污染也非常敏感,我们也无法从单一孔中的扩增曲线来判断是否来源于污染还是来源于真实样本的扩增。这时,就需要阴性对照来监控和发现污染的发生。常用的阴性对照包括以下几种: 无模板对照 No Template Control, NTC 使用水代替定量 PCR 反应中的核酸,其它试剂照常加入,用于监控扩增反应体系中的污染。正常情况下,NTC 孔不会有扩增;当 NTC 出现扩增,则预示体系中有污染。在 SYBR Green 实验中,NTC 出现扩增也可能是来源于引物二聚体的形成
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