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DAF-FM DA (NO荧光探针)

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  • ¥596.80 - 2398.40
  • 碧云天(beyotime)
  • S0019
  • 中国
  • 2026年03月18日
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    • 英文名

      DAF-FM DA

    • CAS号

      254109-22-3

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      柏莱源(天津)生物科技有限公司

    • 保存条件

      -20度储存

    • 规格

      大于100次/大于500次

    规格:大于100次产品价格:¥596.8
    规格:大于500次产品价格:¥2398.4

    产品简介:

    DAF-FM DA即3-Amino,4-aminomethyl-2',7'-difluorescein, diacetate,也称DAF-FM diacetate或4-Amino, 5-aminomethyl-2', 7'- difluorescein, diacetate。DAF-FM DA是用于一氧化氮定量检测的荧光探针,比以前比较常用的一氧化氮荧光检测探针DAF-2 diacetate有多方面的改进。首先,DAF-FM DA和DAF-2 diacetate相比,最后和一氧化氮反应形成的荧光产物受pH值的影响小,在pH值大于5.5时不受pH值的影响。其次,DAF-FM DA和DAF-2 diacetate相比,前者产生的荧光更加稳定,不容易淬灭,这样更加便于检测。另外,DAF-FM DA和DAF-2 diacetate相比,前者对一氧化氮的检测灵敏度更高,相同条件下检测灵敏度可以提高接近2倍,最低检测浓度可以达到3nM。

     

    保存条件:

    -20℃保存,DAF-FM DA需避光保存,一年有效。

     

    使用说明:

    1.装载探针
    对于刺激时间较短(通常为2小时以内)的细胞,先装载探针,后用适当的阳性对照及自己感兴趣的药物刺激细胞。对于细胞刺激时间较长(通常为6小时以上)的细胞,先用适当的阳性对照及自己感兴趣的药物刺激细胞,后装载探针。
    原位装载探针:本方法仅适用于贴壁培养细胞。按照1:1000比例,用本试剂盒提供的DAF-FM DA稀释液稀释DAF-FM DA,使终浓度为5微摩尔/升。去除细胞培养液,加入适当体积稀释好的DAF-FM DA。加入的体积以能充分盖住细胞为宜,通常对于六孔板的一个孔加入稀释好的DAF-FM DA的体积为1毫升。37℃细胞培养箱内孵育20分钟。用PBS(pH7.4)洗涤细胞三次,以充分去除未进入细胞内的DAF-FM DA。
    收集细胞后装载探针:按照1:1000比例,用本试剂盒提供的DAF-FM DA稀释液稀释DAF-FM DA,使终浓度为5微摩尔/升。细胞收集后,用稀释好的DAF-FM DA重悬细胞,细胞浓度为一百万至二千万/毫升,37℃细胞培养箱内孵育20分钟。上述操作可以在离心管内进行。每隔3-5分钟颠倒混匀一下,使探针和细胞充分接触。用PBS(pH7.4)洗涤细胞三次,以充分去除未进入细胞内的DAF-FM DA。直接用适当的阳性对照或自己感兴趣的药物刺激细胞,或把细胞等分成若干份后再刺激细胞。
    2.检测
    对于原位装载探针的样品可以用激光共聚焦显微镜直接观察(用普通的荧光显微镜观察效果相对较差),或收集细胞后用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测。对于收集细胞后装载探针的样品可以用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测,用激光共聚焦显微镜直接观察也可以。
    3.参数设置
    使用495nm激发波长,515nm发射波长,实时、逐时间点或单时间点检测刺激前后荧光的强弱。DAF-FM和一氧化氮反应产物的荧光光谱和fluorescein非常相似,可以用检测fluorescein的参数设置进行检测,用检测FITC的参数设置进行检测也可以。
    4.其它说明
    上述推荐的DAF-FM DA的工作浓度为5微摩尔/升,对于某些细胞,如果发现没有刺激的阴性对照细胞荧光也比较强,可以按照1:2000-1:5000的比例稀释DAF-FM DA,使装载探针时DAF-FM DA的浓度为1-2.5微摩尔/升。相反,如果发现用感兴趣的药物刺激后荧光较弱,可以把DAF-FM DA的工作浓度为调整为10微摩尔/升,以提高检测的灵敏度。另外,探针装载的时间也可以根据情况在15-60分钟内适当进行调整。

     

    产品编号 产品名称 产品包装
    S0019S DAF-FM DA (NO荧光探针) >100次
    S0019M DAF-FM DA (NO荧光探针) >500次

     

    DAF-FM DA (NO荧光探针)代理:柏莱源(天津)生物科技有限公司

    我司代理品牌及优势品牌包含但不限于:sigma、Thermo Fisher、Goldbio、Qiagen、Abcam、ATCC、ECACC、Polysciences、艾本德、天根、Takara、B&D、BIOFLUX、biolegend、R-Biopharm等。

    柏莱源(天津)生物科技有限公司主要从事分子生物学、细胞生物学及免疫学实验相关试剂及耗材的销售,包括核酸提取、PCR产品、血清、细胞培养耗材等产品。

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    该产品被引用文献

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