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- 文献和实验
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50
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广州市左克生物
- CAS号:
2765519-47-7
- 规格:
1mg(4.75mM*200μLinEthanol)
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文献和实验10XVent聚合酶缓冲液,5.0ul ● FdSEQl引物 (10pmol/u1),2.5ul ● 反向引物(10pmol/u1),2.5ul ● 单链scFv模板DNA(10ng),1.0ul● Vent DNA聚合酶(2单位),1.0ul 2. 在有加热盖的热循环仪内加热反应混合液到94℃5分钟。 3. 以94℃30秒、42℃30秒、72℃1分钟的条件共循环25次,扩增VL基因。 4. 用Wizard PCR纯化试剂盒纯化PCR产物。 5. 用XhoI和NotI消化
Protein Expression and Purification of RPA70-AB (181-422)
Comments: pSV281 RPA70AB Constructed by L.Mizoue; May '02.This plasmid encodes RPA 70 subunit residues 181-422 as a fusion protein with an NT 6His tag.The tag can be cleaved off with TEV protease (recognition site is ENLFYQG)leaving "GS" at NT
有效地利用。采用分子建模可以识别出这些残基。本例中随机化残基的选择就是根据分子建模的方法预测哪些残基具有溶剂可接近侧链的。 2. 配制2个50ul PCR反应混合液,1个用于VH基因的扩增。另1个用于VL基因的扩增,包含: ● 水,35.5ul ● 20XdNTP, 2.5ul ● 10XVent聚合酶缓冲液,5.0ul ● 反向引物(10pmol/ul),2.5ul ● 正向引物(10pmol/ul),2.5ul ● scFv基因模板DNA(100ng),1.0ul
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