2-(1H-咪唑-2-基)乙胺二 盐酸盐—17286-47-

NI-NTA蛋白提纯的原理、步骤与常遇问题分析

. 二、Ni-NTA 常见问题及建议 纯化的组分中没有His 标签的蛋白? 首先确定是蛋白没有挂上柱还是蛋白没有被洗脱下来。若His 标签蛋白没有与柱结合： 可能原因：超声的功率不对( 太大，蛋白炭化，太小，蛋白没有释放) 策略：改变超声功率，并在超声前加入溶菌酶 可能原因：样品或者是结合缓冲液不正确： 策略：检测pH 及样品和结合缓冲液的组成份。确保在溶液中鳌合剂或强还原剂的浓度及咪唑的浓度不是太高。 可能原因

一文理清免疫荧光实验流程和常见问题

。 7. 光漂白 减少照明强度/时间。 选用抗荧光淬灭封片剂。   二、背景太高了怎么办？ 大家在操作时可以通过设置对照，帮助我们迅速判断背景的来源。对照包括自发荧光对照（无一抗、二抗）和无一抗对照。 1. 封闭不足 选用二抗种属来源的血清封闭。 选用链霉亲和素/生物素系统，需要用链霉亲和素封闭内源的生物链酶。 选用HRP系统，需要使用过氧化氢等商业化试剂盒去活化内源性HRP。 选用AP系统，需要使用左旋咪唑等商业化试剂去活化内源

糖原及粘液染色法

糖类从组织化学技术的角度分类与生物化学的分类并非一致。从组织化学的角度，糖类可略分为多糖、中性糖液物质和酸性粘液物质及粘蛋白和粘脂质。 多糖主指糖原，是由许多葡萄糖分子以糖苷键组成的聚合体。当机体死亡，即很快分解为葡萄糖。 一、过碘酸—Schiff氏法（简称P.A.S）操作方法： （1）石蜡切片脱蜡至水。 （2） 0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液（过碘酸再结晶应重新配制使用）。