小鼠单核巨噬细胞白血病细胞绿色荧光标记 RAW264.7+G

小鼠单核巨噬细胞RAW264.7的消化及传代

RAW264.7因是单核巨噬细胞其生物学特性就是贴壁特别牢，普通的方法根本就不可能将它消化下来，这也是养这种细胞最头痛的问题。现将我的一点心得，简介如下：消化液：0.5％胰酶、0.2％EDTA，实验前加温到37度以50ml培养瓶为例：1、细胞贴壁生长，长满瓶底80％时，弃去培养液，加D-HANKS 漂洗 两次；2、 加入含胰酶和EDTA的消化液1－2ml,消化37℃约2-5min，镜下可见细胞基本圆形回缩即中止消化，弃消化液加D-HANKS 漂洗两次；3、加入新培养液10ml复吹打混悬细胞

【求助】关于F-GFP和GFP-actin的抗性

dingxiangyua 有哪位高手知道F-GFP和GFP-actin的抗性分别是什么?急求 Fasta921 定位在膜上的GFP （F-GFP） 绿荧光蛋白(GFP)标记肌动蛋白(GFP-Actin) 抗性？不明白！ biyuntian478 lz是啥意思？ 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验

【共享】如何检测GFP、GFP、YFP、EYFP、CFP抗体？

以及定位分析。那么该如何检测GFP其他的一些突变体，如EGFP、YFP、EYFP、CFP的表达和定位呢？我们来看一下GFP标签与其它突变体标签的关系。YFP（Yellow Fluorescent Protein）是黄色荧光蛋白，其序列与GFP基本相同。YFP就是把Thr203以Tyr取代，这样的GFP不发出绿色荧光，而发出较长波长的黄色荧光，也就是YFP。因此两者最大的区别则是发射波长了，在其他序列上没有区别。而EGFP是增强型的GFP，发生了双氨基酸取代，Leu（亮氨酸）取代GFP上的Phe64