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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 品系:
人/动物原代细胞
- 运输方式:
活细胞包邮/冷冻需加干冰
- 规格:
1*10^6
细胞详述
外周血是除骨髓之外的血液。
PBMC(peripheral blood mononuclear cell),外周血单个核细胞,顾名思义,其主要细胞类型为血液里边具有单个核的细胞,主要包括淋巴细胞(T cell\B cell),单核细胞,巨噬细胞,树突状细胞和其他少量细胞类型。其中淋巴细胞占很大一部分。体外检测淋巴细胞首先要分离外周血单个核细胞。
细胞特性
1) 细胞来源于实验动物的正常外周血。
2) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
3) 细胞生长方式:细胞是混合体系,少量贴壁生长,大部分悬浮生长。
产品的运输和保存
1) 1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2) T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输,客户收到细胞请镜下观察细胞生长状态后直接用于后续实验。
产品使用
1) 本产品仅能用于科研
2) 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3) 本产品未通过用于活体诊断的审核
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文献和实验实验材料: 1. 正常兔晶状体组织; 2. 不含Ca 2+ 和Mg 2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 注射器; 4. 培养器具:培养瓶或皿( 用多聚赖氨酸包被)、眼科剪、镊子等; 培养方法: 1. 空气注射处死大兔,在无菌条件下清除巩膜外肌肉及结缔组织后将眼球浸入含双抗的1×PBS(pH7. 2 )浸泡5min ,移入超净工作台内; 2. 用含双抗的1×PBS(pH7. 2 )冲洗 组织
较简单;但容易产生杂质如成纤维细胞等,成纤维细胞生长快,故培养之细胞质量较差;培养的大多数细胞无收缩性;且原代细胞的获得需3~4周,获得大量平滑肌细胞耗时长(17)。既往酶消化法较组织块法复杂、精细;适宜的酶浓度和培养时间的确定较为困难;然而在较短时间内可获得大量的平滑肌细胞,1996年有学者报道(Chambers(18)等)酶消化法纯度为70%。可见一种快速、高效、高纯度的酶消化法培养膀胱平滑肌的方法显得尤为重要。 本实验研究两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24小时均可见膀胱平滑
培养液:MEM(GIBCO),20%FBS,双抗100IU/ml; 原代细胞培养:取5kg左右兔空气栓塞法处死后断头,于无菌条件下从枕大孔处用大止血箝扳开颅骨暴露并小心取出脑组织放入装有DMEM的培养皿中,用眼科镊分离基底动脉后按常规平滑肌方法贴块培养。 传代: (1)吸除培养瓶内旧培养液。 (2)D-Hanks液冲洗2遍。 (3)加入消化液少许,以能覆盖瓶底为限。 (4)倒置显微镜观察发现细胞胞质回缩、细胞间隙增大时,立即终止消化。 (5)吸除消化液,向瓶底注入D-Hanks液
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