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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20°C
- 英文名:
Chlortetracycline hydrochloride
- 库存:
50
- 供应商:
北京沃比森科技有限公司
- CAS号:
64-72-2
- 规格:
250mg
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文献和实验CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 293FT 细胞转染验证 and trouble shooting
前期记录CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 目标基因背景调查CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- sgRNA 及引物设计CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 构建 sgRNA+Cas9 载体golden gate 构建好载体,酶切验证成功293FT 细胞转染验证1. sgRNA+pSpCas9 载体用 lipofectamine 3000 转染至 293FT 细胞(按照转染试剂的说明书走),确保转染效率> 70
性激活/抑制:通过人为突变Cas9的RuvC1、HNH两个剪切位点,Cas9蛋白的切割能力损失变成dCas9蛋白,dCas9和sgRNA复合物可以在DNA的特定位置结合在DNA上,在此基础上,研究人员在复合物的后方连接一些转录调控元件,如转录激活的VP64、VP16等,转录抑制的KRAB等,同时将复合物锚定在基因转录起始区域的上游,即可实现对特定基因的转录激活或转录抑制。dCas9技术原理3.外源过表达和内源激活的区别和选择4.基因干扰和基因敲除的的区别和选择
5.99 5.82 5.69 5.60 5.52 5.46 5.37 5.27 5.17 5.06 4.96 4.85 6 7 6.54 5.89 5.52 5.28 5.12 4.99 4.90 4.82 4.76 4.67 4.57 4.47 4.36 4.25 4.14 7 8 6.06 5.42 5.05 4.82 4.65 4.53 4.43 4.36 4.29 4.20 4.10 4.00 3.89 3.78 3.67 8 9 5.71 5.08 4.72 4.48
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