甲醇中4种酚类 （CAS:)

搞定 CRISPR/Cas9 系统操作

CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具，今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作，仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒，如下图所示： 酶切系统 37 ℃, 3 hr；Run 1% gel，回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端，以利于下游 oligo 退火产物的连接；酶切时请充分，且绝对不能加 CIP 处理

癌症疫苗全新设计——球形核酸疫苗！已在 7 种癌症中研究，曾应用于新冠，效果惊艳

性 T 细胞。 但是，仅通过依赖细胞毒性 T 细胞活性发挥作用的癌症疫苗是远远不够的。如果 T 细胞有更多的方法 (多种抗原) 来识别突变的癌细胞，那么 T 细胞识别突变癌细胞的几率就会更高。因此，亟需开发含有针对多种免疫细胞类型的抗原的疫苗。 对于大多数常规疫苗，通常采用将抗原和佐剂混合后，注射到患者体内。对疫苗结构没有控制，也无法控制疫苗的效果。研究作者 Michelle Teplensky 介绍到，「传统疫苗的一个挑战是，在混合制剂中，免疫细胞可能会识别 50 种抗原和 1 种佐剂

CRISPR-Cas9 技术敲除酵母菌 ADE1 基因

选育新方法。而 CRISPR-Cas9 技术的出现，更是极大推动了微生物基因组编辑准确性和效率的提高。【背景】泓迅科技利用 CRISPR-Cas9 技术编辑酵母菌中的一个 920bp 的 ADE1 基因。ADE1 是腺嘌呤合成相关基因，如果 ADE1 失活，则细胞将会积累红色色素，呈现红色菌落。【方法】1、质粒构建2、sgRNA 活性检测3、挑选活性较高的 sgRNA 进行基因组定点编辑4、利用基因功能变化、表性变化和测序等方法检测基因定点修饰结果。【结论】1、从颜色表型变化得知，酵母菌落变成红色菌落，可知 ADE