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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 英文名:
Isodeoxyelephantopin
- 库存:
50
- 供应商:
北京沃比森科技有限公司
- CAS号:
38927-54-7
- 规格:
5mg
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文献和实验Immunity:北大蒋争凡课题组发现 STING 后高尔基体囊泡转运的重要性及机制
高尔基体(trans-Golgi network, TGN)上的含量最高。细胞中的 PI4P 的含量主要受其合成酶 PI4Ks (PI4KA, PI4KB, PI4K2A 和 PI4K2B) 和降解酶 SAC1 的调控。PI4P 不仅是合成 PIP2 和 PIP3 的前体,也是重要的信号分子,在膜泡运输、脂质转运和细胞器形态维持等方面发挥关键作用。 2021 年蒋争凡实验室利用 STING 自激活突变体诱导细胞死亡的特性,在 HT080 细胞中进行了基于 CRISPR-Cas9 介导的全基因组筛选
variantsof the RNA-guidedendonuclease Cas9[J]。 Mol Cell, 2016, 61(6):895-902[19]Lee CM, Cradick TJ,Bao G, et al. The Neisseria meningitidis CRISPR-Cas9 system enables specificgenome editing in mammalian cells[J]。 Mol Ther, 2016, 24(3):645-54.[20]Li W, Bian X
8. (Bradford 法)做蛋白标准曲线,测定蛋白浓度,测前将总蛋白至少稀释1:10倍以上,以减少细胞裂解液中去垢剂的影响(定量,分装后,可以在-20℃保存一个月) 9. 用PBS将总蛋白稀释到约1 μg/μl,以降低裂解液中去垢剂的浓度,如果兴趣蛋白在细胞中含量较低,则总蛋白浓度应该稍高(如10 μg/μl) 10. 加入一定体积的兔抗到500μl总蛋白中,抗体的稀释比例因兴趣蛋白在不同细胞系中的多少而异 11. 4℃缓慢摇动抗原抗体混合物过夜或室温2h,激酶或磷酸酯酶活性分析建议用2 h室温
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