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- Wissen
- 中国
- VH14773
- 2025年12月17日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 英文名：
cis- Ligupurpuroside B
- 库存：
50
- 供应商：
北京沃比森科技有限公司
- CAS号：
350588-96-4
- 规格：
10mg
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文献和实验手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因
继续培养。7. 14000rpm 离心收取细胞 30s。加入 20 - 60ul solution A 裂解细胞。95 ℃ 加热 10 min, 然后加入同样体积的 solution B, 涡旋震荡一下, 13000rpm 离心 0 min。取上清做基因型鉴定的模板。8. 做完基因型鉴定后，只继续培养基因敲除的细胞克隆。9. 当基因敲除的细胞克隆长满时，胰酶消化，进行细胞计数。以 40 个细胞每 10 毫升进行 10 倍梯度稀释。10. 第 9 步中培养液也就是条件刺激培养液，也就是收集第 9 步
CRISPR-Cas9 全程实操教程：从 gRNA 设计到挑单克隆全程指导
基本原理CRISPR-Cas9 是一种细菌获得性免疫，用于降解入侵的外源 DNA。CRISPR RNA (crRNA) 与转录激活 crRNA (Trans-activating crRNA， tracrRNA) 退火形成的复合物能特异性识别与其互补的基因组序列，引导 Cas9 核酸内切酶在目的片段生成 DNA 双链断裂，如下图所示。通过基因工程手段对 crRNA 和 tracrRNA 进行改造，将其连接在一起得到 sgRNA (single guide RNA)。通过将表达 sgRNA
Determination of target protein solubility
growth 1. Inoculate 10 ml LB medium containing 100 mg/ml ampicillin and 25 mg/ml kanamycin in a 50-ml flask. Grow the cultures overnight at 37℃ with shaking. Kanamycin should be omitted when using the cis-repressed pQE-80L series of vectors
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