千里光菲灵碱 （CAS:480-81-9)

北大伊成器团队 Nature Method 发文，揭示单碱基编辑脱靶风险！

后，相应的测序信号都出现了极大的降低。这些结果都表明了 CBE 脱靶效应的存在。 作者对脱靶现象进行了进一步细分，发现这些脱靶现象发生的靶点可以被分为 Cas9 依赖性以及 Cas9 非依赖型。 图片来源：Nature Method 为了验证 Detect-seq 的可靠性，作用将 Detect-seq 与此前被用来研究 Cas9 依赖型脱靶效应的工具进行了对比。与 GUIDE-seq 相比，Detect-seq 识别出了大部分 GUIDE-seq 在 EMX1 与 VEGFA_site_2 中识别

5 分钟学会 cas9 基因敲除——原来设计方案如此简单

CRISPR/Cas9 系统作为细菌和古细菌的获得性免疫系统， 通过 RNA 介导特异性的切割外源遗传物质， 用以对抗入侵的病毒和质粒。利用 Cas9 来摧毁入侵 DNA 的 Type Ⅱ CRISPR/Cas 系统， 可以在体外进行基因的编辑。为了提高CRISPR/Cas9 的特异性，使用 Cas9 切口酶和一对 sgRNA，两个相近的切口造成 DNA 双链断裂， 诱导细胞发生非同源末端连接修复， 造成目的基因的突变。利用 CRISPR/Cas9 进行基因的编辑，首先要构建有效的 sgRNA

凋亡和细胞周期调控相关基因的应用

个内源性表达的细胞周期基因。为此我们使用LightCycler® 480实时荧光定量PCR仪和RealTime ready细胞周期检测预制多孔板。用特异抗体和流式细胞术测定天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3的激活。在这个分析中，我们发现C24ORF17和BARD1基因下调后，天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3的激活增加了。为了确定编码蛋白在凋亡诱导中的作用，在本研究中我们使用RealTime ready凋亡检测预制多孔板和LightCycler® 480仪器，通过qRT-PCR分析了当通过RNAi而表达