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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
2年
- 英文名:
Recombinant phospho-14-3-3E(Thr232) Protein
- 库存:
999
- 供应商:
允麦生物
- 规格:
100ug
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文献和实验相关专题 在western blot ting 方面,本文绝对是一个新手,目前正准备磷酸化蛋白的Western,急需这方面的实验技术操作步骤和一些注意事项的指导。在网络上搜集整理了一个western blot实验达人的建议,供大家参考。 我做了很久的western blot ,尤其是phospho-抗体,可以算是达人了。我根据自己的经验,对磷酸化蛋白之western blot提出以下建议,供刚入门的同仁参考
[资源] 申请上传 Current Protocols In Protein Science (60M) 见公共邮箱
5.7 Overview of Protein Expression in Pichia pastoris Unit 5.8 Culture of Yeast for the Production of Heterologous Proteins Unit 5.9 Overview of Protein Expression by Mammalian Cells Unit 5.10 Production of Recombinant Proteins in Mammalian Cells Unit 5.11
我做了很久的western blot,尤其是phospho-抗体,可以算是达人了。我根据自己的经验,对磷酸化蛋白之western blot提出以下建议,供刚入门的同仁参考:1. 一定要在lysis buffer中加入蛋白酶抑制剂,还要加入一定量的磷酸酶抑制剂,否则即使band压出来也会很浅,结果也不可信。 2. 加一抗后最好4度过夜,保证抗体有充分的结合时间。因为磷酸化的蛋白只占总的蛋白量的极少部分。4度也可使一抗重复使用多次。毕竟磷酸化的抗体都挺贵的。二抗则室温1小时即可
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