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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
2年
- 英文名:
Recombinant DREF Protein
- 库存:
999
- 供应商:
允麦生物
- 规格:
100ug
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文献和实验【实验目的】1.掌握DNA重组技术的基本原理和基本方法2.熟悉质粒DNA的小量制备及酶切鉴定方法【实验原理】1.DNA重组技术 重组DNA(Recombinant DNA)技术是遗传工程的核心技术,也是人类在基因和DNA分子水平进行操作的技术。它包括以下几个步骤: 1)重组DNA分子的构建:即将目的基因(DNA或cDNA片段)与载体DNA重组,应用TA克隆方法,将PCR扩增产物快速克隆至质粒载体中。该方法利用了PCR过程中使用的热稳定聚合酶(Taq酶)在所复制的双链分子末端加上单一脱氧
的不稳定,导致克隆DNA部分的缺失或重排。为克服上述缺点,人们采用低拷贝数复制子载体,如,E coli中的F因子。此质粒含有2种基因(part A, part B)。每个E coli能接受 >300kbDNA片段。 2、噬菌体PI载体和PAC PI噬菌体与λ噬菌体一样,外有蛋白质壳。内含相当大的(110~115kb)线性DNA,并在体外包装于PI壳内。PI进入宿主细胞后环化,扩增。 1994年,有人将PI和F因子克隆结合产生PI人工染色体克隆系统-----PAC。 3、酵母人工染色
玉米Proline responding 1(pro1)突变在蛋白合成和细胞周期调控中起到关键作用
生化的影响是多方面且重要的。RNA-seq (Figure 5)证实pro1突变体中脯氨酸的缺乏引起了细胞周期相关基因、DNA复制相关基因以及细胞增殖相关基因表达的下调,体外添加脯氨酸后这些基因表达回复至野生型水平(Figure 6A、B)。脯氨酸作为一种重要氨基酸,它的信号分子作用会涉及细胞内部多种多样的生理平衡和生化过程:通过GCN2,mTOR等与氨基酸缺乏偶合的调控环节,可改变细胞原有的基因表达模式,涉及蛋白合成与细胞周期等生命活动,诱导细胞进入修复,停滞或凋亡的模式。Figure 5 Gene
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