Western抗体洗脱液

自行配制western blot抗体洗脱液配方

相关专题 老板说节约实验经费，试剂溶液能自己配置的就都自己配置，不买没必要的试剂。下面是我们实验室用的抗体洗脱液配方：主要是参考了分子 克隆那本实验室宝典。 抗体洗脱液配方 100mmol/L 2-Mercaptoethanol，2%SDS，62.5m mol/L Tris·HCl pH6.8 14.4 mol/L 2- Mercaptoethanol(β-巯基乙醇) 700 ml(通风厨里加) SDS

细胞上清液提取常见问题解析

培养 24 - 48 h，细胞汇合度达到 80% - 95% 左右时收取上清，该上清液即可用于提取外泌体。 使用外泌体专用无血清培养基： 待细胞汇合度~50%时，移去原有完全培养基，添加新培养基进行培养，新培养基由 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基组成； 待细胞生长汇合度约为70-80%时，移去培养基； 使用1×PBS溶液将细胞润洗2-3次； 加入外泌体专用无血清培养基继续培养24 - 48 h，待细胞汇合度到 80% - 95% 时收取细胞培养上清液，该上清液即可用于外泌

从免疫血清纯化抗体

配置100 mM 甘氨酸(pH 2.5)抗体洗脱液，将膜置于洗液中，手轻摇混匀2 min，迅速将洗液转移至装有100 μl 1 M Tris（pH 8.0）中和，使抗体复性。第1 次洗脱用400 μl 抗体洗脱液，第2，3 次用200 μl。7． 往洗脱下来的液体中加入100 μl Buffer A 以稳定抗体，并分装成30 μl 每管，于-20℃保存。注：所有步骤均在室温完成。Buffer A：5% BSA，10 mM Tris，0.15 M NaCl，0.2% NP-40，pH 7.4。