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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体名:
P38相互作用蛋白抗体
- 抗体英文名:
Anti-FAM48A抗体
- 浓度:
1mg/ml
- 应用范围:
WB=1:1000-2000 ELISA=1:1000 IHC-P=1:200-500 IHC-F=1:200-500 ICC=1:200-500 IF=1:200-500 Flow-Cyt=1ug/Test
- 宿主:
Mouse/Rabbit
- 适应物种:
咨询客服
- 保质期:
2年
- 抗原来源:
进口
- 级别:
生物技术级
- 库存:
999
- 供应商:
上海允麦生物
- 标记物:
提供相应标记抗体及二抗
- 克隆性:
Monoclonal/Polyclonal
- 保存条件:
-20
- 形态:
浓缩液
- 亚型:
IgG
- 免疫原:
KLH conjugated synthetic peptide derived from FAM48A
- 规格:
100UL
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文献和实验一、原理: 免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)技术是检测蛋白质间相互作用的经典方法,基本原理是以细胞内源性靶蛋白为诱饵,将靶蛋白抗体与细胞总蛋白进行共孵育,促进免疫复合物的形成;随后加入能够与抗体Fc段结合的proreinA/G(预先结合固化在琼脂糖小珠上),形成“结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体-proteinA/G小珠”复合物,纯化该复合物后凝胶电泳分离蛋白,应用Westernblot或者质谱技术鉴定靶蛋白的结合蛋白。 与其它研究方法相比,免疫
共沉淀或GST-pull down实验进行验证。 2. 免疫共沉淀:是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内相互作用的有效方法。当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。当用预先固化在argarose beads上的蛋白质A的抗体免疫沉淀A蛋白,那么与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来。再通过蛋白变性分离,对B蛋白进行Western blot检测,进而证明两者间的相互作用。 3. GST
之外,在做组蛋白修饰 ChIP 时,因为各种组蛋白修饰之间差异非常小,这对抗体特异性提出了更高的要求。如果抗体特异性不够高导致发生交叉反应,很可能产生假阳性或假阴性结果。针对这一问题,可以使用包括 384 种不同修饰的组蛋白芯片检测自己生产组蛋白抗体特异性,保证组蛋白抗体的高特异性。 没有特异性抗体怎么办? 如果目标蛋白没有商业化的抗体可选,一种方式是定制抗体,之后进行 ChIP 验证。这种方式的优点是检测到的是内源性的蛋白,结果反映的一定是体内真实的蛋白和 DNA 相互作用
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