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小鼠
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文献和实验Cell Metabo: 另辟蹊径!武汉大学李红良等团队合作发现 2 型糖尿病治疗新靶点
化突变体工具和染色质免疫沉淀技术,发现 NLK 的磷酸化功能可以促进 CRTC2 和 FOXO1 的核输出,导致 CRTC2 的蛋白酶依赖性降解,抑制 FOXO1 的自我转录活性和表达,从而降低糖异生关键酶基因表达。图片来源: Cell Metabolism 3. NLK 在体内葡萄糖稳态的生理和病理调节中充当重要角色 随后,研究团队使用 Ad-GFP、Ad-NLK 或 Ad-K167M 的过表达腺病毒处理 C57BL/6 小鼠。体内实验结果说明,过表达 NLK 足以抑制肝糖异生,并以激酶依赖的方式
表达后修饰,直接具有完全酶活。发光机制生物荧光实质是一种化学荧光。萤火虫荧光素酶在Mg2+、ATP、O2的参与下,催化D2荧光素(D2luciferin) 氧化脱羧,产生激活态的氧化荧光素,并放出光子,产生550~580 nm 的荧光,其化学反应式如下。这种无需激发光就可发出偏红色的生物荧光,其组织穿透能力明显强于绿色荧光蛋白(GFP)。荧光素酶是靠酶和底物的相互反应发光,特异性很强,灵敏度高,由于没有激发光的非特异性干扰,信噪比也比较高。二、荧光素酶报告基因的检测流程1、重组质粒制备: 制备含有
Plant DNA methylation analysis by bisulfite genomic sequencing
) at temperature appropriate for used restriction enzyme; Add 0.5ml Tris-buffer-saturated phenol-chroroform, vortex; Centrifuge with Eppendorf 5414 or equivalent at 10000 x g for 2 minutes; Transfer the upper aqueous phase to clean 1.5ml
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