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- 2025年11月28日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8°C 真空环境
- 英文名：
(R)-Methyl 2-(benzhydrylsulfinyl)acetate
- 库存：
50
- 供应商：
北京沃比森科技有限公司
- CAS号：
713134-72-6
- 规格：
1g
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文献和实验CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 293FT 细胞转染验证 and trouble shooting
前期记录CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 目标基因背景调查CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- sgRNA 及引物设计CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 构建 sgRNA+Cas9 载体golden gate 构建好载体，酶切验证成功293FT 细胞转染验证1. sgRNA+pSpCas9 载体用 lipofectamine 3000 转染至 293FT 细胞（按照转染试剂的说明书走），确保转染效率> 70
CRISPR-Cas9 全程实操教程：从 gRNA 设计到挑单克隆全程指导
基本原理CRISPR-Cas9 是一种细菌获得性免疫，用于降解入侵的外源 DNA。CRISPR RNA (crRNA) 与转录激活 crRNA (Trans-activating crRNA， tracrRNA) 退火形成的复合物能特异性识别与其互补的基因组序列，引导 Cas9 核酸内切酶在目的片段生成 DNA 双链断裂，如下图所示。通过基因工程手段对 crRNA 和 tracrRNA 进行改造，将其连接在一起得到 sgRNA (single guide RNA)。通过将表达 sgRNA
;,α’-偶氮双异丁腈 Amamyl=pentyl戊基 anhanhydrous无水的 aqaqueous水性的/含水的 Araryl,heteroaryl芳基，杂芳基 azdistazeotropicdistilation共沸精馏 9-BBN9-borobicyclo[3.3.1]nonane9-硼双环[3.3.1]壬烷 BINAP(R)-( )-2,2’-bis
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