4-(丁基磺酰基)苯胺 （CAS:51770-72-0)

CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 293FT 细胞转染验证 and trouble shooting

前期记录CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 目标基因背景调查CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- sgRNA 及引物设计CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 构建 sgRNA+Cas9 载体golden gate 构建好载体，酶切验证成功293FT 细胞转染验证1. sgRNA+pSpCas9 载体用 lipofectamine 3000 转染至 293FT 细胞（按照转染试剂的说明书走），确保转染效率> 70

用GC、GC/MS方法检测人尿中Selegiline及其代谢物

下吹干，再以100 L乙酸乙酯溶解，GC/MSD进样2 L。在进行selegiline代谢物amphetamine，methylamphetamine及norSelegiline尿中排泄趋势试验中，尿样提取程序如下：分别取0-72小时收集的各份尿样5 ml，加入0.5 ml 5M KOH，3 g NaCl，2 ml 5 ppm二苯胺(内标)的叔丁基甲醚溶液，振摇，离心，分离醚层，于GC进样2 L。   点击查看全文 用GC、GC/MS方法检测人尿中Selegiline及其代谢

CRISPR-Cas9 全程实操教程：从 gRNA 设计到挑单克隆全程指导

基本原理CRISPR-Cas9 是一种细菌获得性免疫，用于降解入侵的外源 DNA。CRISPR RNA (crRNA) 与转录激活 crRNA (Trans-activating crRNA， tracrRNA) 退火形成的复合物能特异性识别与其互补的基因组序列，引导 Cas9 核酸内切酶在目的片段生成 DNA 双链断裂，如下图所示。通过基因工程手段对 crRNA 和 tracrRNA 进行改造，将其连接在一起得到 sgRNA (single guide RNA)。通过将表达 sgRNA