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赛米科(杭州)生物科技有限公司
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1 Kit
赛米科鼠B细胞扩增培养试剂盒的核心技术原理
核心技术流程
抗原包被板式富集 → 抗原特异性记忆B细胞精准捕获 → 优化培养基与饲养细胞系统支持培养/分化 →单B细胞培养或群体培养
与传统杂交瘤相比,鼠B细胞扩增培养试剂盒具有四大突破性优势:
1、显著提升阳性率
通过抗原包被板对目标B细胞进行预富集,从源头提高特异性B细胞比例。后续培养中阳性克隆检出率显著高于传统杂交瘤方法,实测高值孔(OD>1.0)阳性率可达21.9%,较传统方法提升数倍至数十倍,大幅提升筛选效率。
图1:Elisa抗原检测高值孔结果1

图2:Elisa抗原检测高值孔结果2

2、高效保留抗体多样性34
本方法直接分选抗原特异性记忆B细胞并进行体外培养,避免了细胞融合过程中的随机损耗。相较于杂交瘤技术更倾向于筛选易融合、分泌能力强的B细胞,该方法可有效保留体内B细胞库的多样性,有助于获得识别稀有表位或具有独特功能的抗体序列。
图3:10X物镜

图4:20X物镜

A. 流式分选后,鼠单B细胞培养7天后,Elisa抗原检测结果:阳性率为10.1%,高值孔(OD>1.0)占比高达48.3%
图5:Elisa抗原检测结果

3、大幅缩短开发周期1
无需进行细胞融合及多轮亚克隆操作,简化实验流程。在完成免疫后,最快3周内即可获得大量候选抗体序列或/和重组抗体表达上清,显著加快抗体开发进度,满足课题快速推进的需求。
4、兼容多种下游应用路径
培养后的B细胞可直接用于单B细胞测序、群体上清检测,也可作为起始材料进行高效杂交瘤构建,灵活支持不同研究需求,实现多路径衔接。
l 路径一(单B细胞级): 可直接进行单B细胞铺板,结合细胞测序,快速获取全长抗体基因。
l 路径二(杂交瘤兼容): 对富集后的B细胞进行群体培养,收集激活培养增殖后的抗原特异性B细胞用于融合,可以极大提高杂交瘤阳性率,实现新旧技术的完美融合。
赛米科鼠B细胞扩增培养试剂盒的核心优势,不仅体现在整体流程设计上,也体现在每一个关键组分的精细优化中:
l 优化的培养基配方:独家研发 B 细胞完全培养基,在基础营养保障之外,搭配优化组合的细胞因子配比,可高效支持(单)B 细胞的体外存活、增殖、分化,同时提升抗体分泌能力。
l 特殊种属优化的饲养细胞:采用过表达细胞表面受体与细胞生长因子的稳定细胞系,能提供强力激活生长及转化信号,促使记忆B细胞在体外稳定高效分化为浆细胞,同时维持其抗体分泌能力,7天内即可使上清抗体浓度达到普通应用筛选的有效标准。
l 卓越的富集效率:抗原包被B细胞富集工艺经过反复严格验证,同步配套全套工艺相关试剂耗材,可实现对抗原特异性B细胞的高效、特异性捕获,兼具高性价比与高结果复现性。
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文献和实验降低二次感染新冠的风险,减轻可能感染后产生的症状的严重程度。 图2 新冠疾病中抗原特异性T细胞体外扩增及应用 货号 产品名称 作用 CT-006 细胞毒性T细胞高效扩增试剂盒 体外培养获得大量高纯度细胞毒性T细胞 CT-014 细胞毒性T细胞高效扩增试剂盒(增强版) 体外培养获得大量高纯度细胞毒性T细胞 CT-016 抗原特异性T细胞高效扩增试剂盒(SARS-COV-2)
长度可达 20kb,适合于各种 GC 含量的扩增,可用于多种样本的直接 PCR 如植物叶片、全血等。且扩增仅需 30s/kb,甚至于 2kb/s。如此卓越,爱不释手了吧? 4. 选择直接扩增试剂盒对粗品扩增 vazyme 生产的各种直扩试剂盒,直接对粗品进行扩增,大大减少了实验的工作周期。如小鼠基因型鉴定可以直接使用 One Step Mouse Genotyping Kit,全血扩增可以直接使用 Blood Direct PCR Kit V2。
LightCycler通过实时荧光PCR技术进行DNA甲基化分析
的定量。 更多有关特定CpG位点的甲基化的详细信息,可采用重亚硫酸氢盐修饰后测序分析。 LightCycler主要应用:实时荧光PCR技术进行快速准确的DNA甲基化分析 我们使用罗氏诊断公司的LightCycler®480高分辨熔解扩增试剂盒在LightCycler®480实时荧光PCR仪上,通过MS-HRM测定法对两种已知的经过启动子(FANCE和MGMT)甲基化的DNA修复基因的检测性能。 材料和方法 将多种细胞株的DNA样本作为检测模板。每μg的每种DNA样本都经过重亚硫酸盐修饰
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