- ¥1490
- 再康生物
- ZK-0115697
- 国产/进口
- 2025年11月21日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
20
- 英文名：
Bovine Lumpy Skin Disease Virus(LSDV)
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海再康生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
Bovine Lumpy Skin Disease Virus(LSDV). PCR Kit
本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液，浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷，能避免PCR操作过程中的污染，使用时只需取适量2×TaqPCR MasterMix溶液，加入模板和引物，并加入去离子水补足体积，使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀，操作需在冰上进行。
Taq：扩增效率最高的耐热 DNA 聚合酶，其扩增速度约为 1-2kb/min。扩增碱基出错率为 10-5 左右。其产物未端带有 A，可直接用于 TA 克隆。
Pfu：目前保真度最高的耐热 DNA 聚合酶，碱基出错率为 10-6，但扩增效率低于 Taq 酶， 一般能很好的扩增 2kb 以下的片段。其扩增速度约为 500bp/min 左右。其产物为平未端，须加 A后才可用于 TA 克隆。
Taq Plus：Taq 和 Pfu 的等比混合物。集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比 Pfu 高， 保真度比 Taq 好。其扩增速度约为 1000bp/min 左右。其产物未端带有 A，可直接用于 TA 克 隆。 含染料 PCR MasterMix 反应完后可以直接电泳检测。不含染料的 PCR MasterMix 反应完后 加入上样缓冲液后电泳检测。
| 产品名称 | 方法 | 规格 | 价格 |
| 牛结节疹病毒LAMP试剂盒 | LAMP | 50次 | 2490元 |
| 牛结节疹病毒PCR试剂盒 | PCR | 50次 | 1490元 |
| 牛结节疹病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 染料法 | 50次 | 2490元 |
| 牛结节疹病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 探针法 | 50次 | 3490元 |
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增牛结节疹病毒，与其他微生物没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
规格及成分
| 成分 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 试剂一 | 1 mL（红盖） |
| 超纯水 | 试剂二 | 1 mL（亮黄色） |
| 牛结节疹病毒PCR引物混合液 | 试剂三 | 100 μL（白盖） |
| 牛结节疹病毒PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） |
试剂四 | 50 μL（黄盖） |
| 核酸释放剂（试用装） | 试剂五 | 20 次（1 mL，绿盖） |
| 使用手册 | 试剂六 | 1 份 |
自备试剂：样品 DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送20 次核酸释放剂试用装，其使用手册可以从本公司网站订购核酸释放剂。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加 10μL 补骨脂 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
| 成分 | N+2 个样品管 | PCR 阴性对照 | PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 牛结节疹病毒PCR引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照（水） | -- | 18 μL | -- |
| PCR 阳性对照（牛结节疹病毒PCR阳性对照的 1000 倍稀释液） |
-- | -- | 18 μL |
- 按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应（35 个循环） | 95℃ | 15 sec |
| 57℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
牛结节疹病毒PCR试剂盒常见问题与解决方法:
| 常见问题 | 可能原因 | 解决方法 |
阳性对照、待测样本均无条带。 |
PCR反应体系或反应条件不合适。 | 使用梯度PCR摸索PCR反应条件。 |
| PCR试剂保存不当失去活性。 | 2× PCR Mix应保存于-20℃，使用时避免反复冻融。若使用频繁，可在4℃短时间存放。 | |
| 引物设计问题。 | 尝试重新设计引物进行检查。 | |
阳性对照有目的条带，待测样本无条带或条带弱。 |
不当储存或长期储存引起试剂活性丧失。 | 使用新鲜的试剂。 |
| 加入组织裂解液过量。 | 增大反应体系，或减少裂解液的用量。 | |
| 样本裂解混合液保存不当或保存时间过久，DNA基因组已经降解。 | 裂解混合液液可在4℃保存2-3天，尽量使用新制备的裂解液混合液进行PCR。 | |
| 模板加入量不适合。 | 在反应体系10-20%范围内优化模板加入量。反应效性能较差时，可以降模板浓度调节到低于10%的范围。 | |
| PCR循环数不足。 | 适当增加PCR的循环数，推荐在35-40循环为佳。因为模板复杂，一般PCR反应要比用纯化的 DNA模板多5-10个循环为佳。 | |
非特异性扩增 |
PCR退火温度太低，循环数、引物浓度或模板浓度太高。 | 增加PCR退火温度，降低PCR循环数、引物浓度或模板浓度。 |
| PCR引物错配。 | 重新设计PCR引物。 | |
| 配制PCR反应体系时温度太高或配制完成后放置时间太久。 | PCR反应体系的配制在低温下进行，配制完成后尽快进行PCR扩增反应。 | |
阴性对照出现目的条带 |
操作工具或试剂污染。 | 实验所有试剂或器材均应高压灭菌。操作时应小心轻柔，防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外。 |
| 样本间交叉污染。 | 每个取样器只对一个样本使用；或取完一个样本后，将取样器刃口浸入2%的次中，反复涮洗，然后用干净的纸巾擦干残液。 |
特别提示：本公司的所有产品仅用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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文献和实验D+R D或R + + + + - + + + + - - - - + + *D=DNA（脱氧核糖核酸）；R=RNA（核糖核酸） **有些细菌与立克次氏体对干扰素也敏感。 第一节 病毒的形态与结构 一、病毒的大小与形态 病毒个体微小，测量病毒大小的单位是毫微米（nm），即1/1000微米。在型病毒（如牛痘苗病毒）约200～300
本病是多种原因引起的主要累及真皮浅层小血管的过敏性炎症性皮肤病，好发于四肢，以小腿、踝周尤为显著。临床表现有丘疹紫癜、风团、小水皰、多形性红斑、小结节，以红斑和结节较常见，病程慢性，可迁延达数年之久。本病常发生于青年男女，可能的诱因包括细菌、病毒感染以及某些药物因素，鉴于本病的形态多样、病程长，如能尽早明确诊断有助于缩短病程，减少痛苦，提高疗效。 临床表现 1.初期皮损为粟粒大小红色斑丘疹与紫癜； 2.红斑基础上出现黄豆大小水皰、血皰与结节； 3.水皰
结节性红斑系多种原因引起的急性炎症性结节性皮肤病，是发生于皮下组织的非特异性炎症，好发于小腿伸侧。临床表现为散在鲜红色圆或椭圆形结节，可有自觉痛与压痛，愈后不留瘢痕。本病多见于青年女性，好发于春秋季，在我国结核病是常见的病因，溶血性链球菌感染、病毒、酶菌感染或某些药物亦可诱发，所以尽可能明确病因，是取得良好治疗效果的关键。 临床表现 1.乏力、发热、关节与肌肉疼痛； 2.典型皮疹为散在分布、大小不等的鲜红色圆形或椭圆形结节，略高出皮面，表面光滑，中等硬度
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