毕赤酵母GS200菌种

【原创/分享】GS115毕赤酵母表达外源蛋白较详细步骤！！！（从验证到阳性克隆的筛选）

小弟把最近一个多月来所做的工作，做了个总结，供大家一起分享，希望版主能加分，现在我还是0分，很多帖子不能阅览，希望版主加分，今后我实验有了新的进展，我会把总结发上来，和大家一起分享。我做的是GS115表达VEGF，目前已经做到阳性克隆的筛选这一步。待以后再次做了总结，再与大家分享。希望大家支持，绝对原创！！！ 一.实验材料 1．菌珠 E.coli DH5α GS115酵母菌 2．质粒 PIC9K/VEGF165重组质粒 3．试剂 NB酵母氮源 G418 gl2、Not1

血液基因组DNA提取试剂盒操作指南（DP348）——200μl 以内抗凝全血

以下操作按照天根产品 DP348 血液基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 抗凝血 （200 μl以内抗凝全血，不足200 μl可加缓冲液GS补足体积至200 μl）2. 移液器及配套无菌枪头（200 μl ，1ml）3. 无水乙醇4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机备注：本实验以人血为例，如提取哺乳动物全血可以用此流程，如果禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝

毕式酵母表达常见问题及解析

单菌落，接种至含有5ml YPD培养基的50ml三角瓶中，30℃、250~300r/min培养过夜；取100~500μl的培养物接种至含有500ml新鲜培养基的2L三角摇瓶中，28~30℃、250~300r/min培养过夜，至OD600达到1.3~1.5。（2）电击后马上加入1ml冰预冷的1mol的山梨醇溶液将菌体混匀。（3）推荐：电压1.5kV；电容25μF；电阻200Ω。电击时间为4~10msec。5、问：在下是初学者，关于毕赤酵母的诱导表达有些问题： “每24h 向培养基中添加100％甲醇