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文献和实验的发生有关。 拿到这样的结果,已经是一个很好的开始了。 图片来源:文献截图 2、从 mRNA 到 miRNA 寻找靶向关系 从 mRNA 到 miRNA 也是这个研究引入外泌体的重要步骤。作者预测了可能与 FOXO1 靶向的 miRNA,根据软件预测结合文献研究,最终选择了 miR-135b。 发现 miR-135b 在胃癌组织中显著上调,表达与 FOXO1 的 mRNA 水平呈现负相关,说明他们之前可能存在靶向调控关系。 当然,作者在文章中没有一开始去验证这个关系,在后续通过双荧光素酶实验
了来自结肠直肠癌(CRC)患者和健康人血清外泌体中的 miRNA 表达有明显的差异。 作者先通过外泌体 miRNA 测序(4 个 CRC 患者和 2 个健康人)观察外泌体的 miRNA 差异表达,选取了 29 个下调 miRNAs 和 9 个上调 miRNAs 作为候选标志物。 再使用 RT-qPCR(165 个 CRC 患者和 153 个健康人)进一步验证,最后发现与健康人相比,早期 CRC 患者外泌体 miR-99b-5p 和 miR-150-5p 的表达水平显著降低,术后外泌体 miR-99b-5
浸泡固定2~24h。另外,该固定剂较为温和,适于组织标本的较长期保存。2、4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠试剂:A液:多聚甲醛40g蒸馏水 400mlB液:Na2HPO4•2H2O16.88g蒸馏水 300mlC液:NaOH 3.86g蒸馏水 200m配制方法:A液最好在500ml的三角烧瓶中配制(方法同前),至多聚甲醛完全溶解后冷却待用。注意,在溶解多聚甲醛时,要尽量避免吸入气体或溅入眼内。B液和C液配制好后,将B液倒入C液中,混合后再加入A液,以1n NaOH或1N HCl 将pH调至
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