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再康生物
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100 mL
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文献和实验supplement,青霉素、链霉素各100U/ml,EGF 20 ng/mL,b-FGF 10ng/mL。用火焰抛光的吸管反复吹打,分散组织制成单细胞悬液,吸取9滴细胞悬液、1滴0.4℅台盼蓝溶液混合,用血细胞计数板在3分钟内计数出活细胞和死细胞(台盼蓝排斥法),调整细胞密度,以105个/ mL接种75mL培养瓶中(NUNC), 于5℅CO2 培养箱, 37℃培养。期间倒置显微镜下观察细胞的生长状况。 ②传代培养:当神经球直径大约100um时收集细胞于离心管中,600转离心5分钟,弃上清,加入无血清培养基重悬
动物细胞培养中Hanks液、D-Hanks液和消化液的配制方法
进该5.6%NaHC03溶液使最终体积为100 mL。瓶装保存,备用)。 ***仪器(请参看仪器图库): 抽滤泵1套,过滤器1套,高压灭菌锅,量筒,磁力搅拌器,研磨器。 实验步骤: (一)配制D-Hanks液 1.按表2—3—5称取D-Hanks试剂。 2.依次加入上述试剂至800 mL蒸馏水中,溶解后定容至1 1000 mL。 3.高压灭菌,10磅10 min。 (二)配制Hanks液 1.按表2—3—5称取
链霉素。2、消化液:胰酶(效价为1:250) 0.08%、胶原酶II(活力为150U/mg) 0.05% ,用pH 7.2-7.8 的D-Hanks溶液配制,-20 ℃保存。3、D-Hanks溶液(pH 7.2-7.8):KCl 0.4 g 、KH2PO4 0.06 g 、NaCl 8.00g 、NaHCO3 0.35 g 、Na 2HPO4•7H2O 0.09 g 、酚红 0.01 g 1L。三、实验步骤取生后1-4d的乳鼠,用75%乙醇消毒皮肤,再用大头针固定乳鼠的头及四肢,剪开
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