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文献和实验PCR(Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶链式反应,对于常年狂奔在实验室的实验狗来说并不陌生。那么,对于 PCR 反应的核心成份,DNA 聚合酶,你选对了吗? 常见的 DNA 聚合酶如 Taq、Phanta、Pfu、KOD、Primerstar、Klenow、Bst、Phi29 等等。根据耐热性来分可分为耐热酶和常温酶。耐热聚合酶如 Taq、Pfu、KOD、Primerstar 等,常温聚合酶包括 Klenow、Bst、Phi29 等。根据保真度来分,高保真聚合
性蛋白形式保持其天然构象,同时全长多跨膜蛋白通常表达水平较低,这些都是跨膜蛋白表达的难点所在。如何获得最为天然构象和具有功能活性的膜蛋白是开发这一类靶点抗体药物的核心所在。目前针对跨膜蛋白靶点,其抗原开发策略及相关问题如下: 表达胞外结构域(ECD):表达胞外N端或LOOP区结构域的方法简单,并且相对而言有较高的表达量,是行之有效的方法之一。但是对于多跨膜蛋白而言,表达蛋白胞外区的方式很难模拟蛋白的天然构象,可能造成一些抗原表位(比如构象表位)的遗失,也有可能对蛋白活性有一定的影响
Bst-catalyzed radiolabeled DNA sequencing
Bst DNA polymerase-catalyzed radiolabeled two-step sequencing reactions are modified from those presented earlier by altering the absolute amounts and the relative deoxy/dideoxynucleotide ratios in the termination mixes
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