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文献和实验相关专题 DNA连接与转化 农杆菌感受态细胞的制备 1.挑取少许农杆菌LBA4404,接种于5ml LB液体培养基 (含50mg/L STR)中,28℃、200r/mim培养过夜。 2.取2ml培养物于LB液体培养基 (含50mg/L STR) 中继续培养,直至OD800 为0.5左右。 3.将培养物置冰浴中30min,4℃、5000r/min、离心5min,弃去上清液。 4.用10ml冷
一.农杆菌感受态细胞的制备 (同大肠杆菌质粒DNA的提取),然后将其转化大肠杆菌,再提取大肠杆菌的质粒DNA进行酶切鉴定。取-70℃保存的EHA105于含有50μg/ml链霉素平板划线,28℃培养2天。挑单菌落接种于5ml YM(0.5g/L KH2 PO4 ,10 g/L Mannitol,2 g/L L-Glutamine,0.2 g/L NaCL,0.2 g/L MgSO4 ,0.3 g/L Yeast extract,PH7.0)液体培养基中,220rpm,28℃振荡培养18 hr
Agrobacterium growth and transformation (农杆菌培养及转化)
. The most commonly used strains LBA4404 and GV3101 carry chromosomal resistance to rifampicin, each has a Ti-plasmid (carrying vir [virulence] genes) which encodes another antibiotic resistance. This is summarised in the table below. GV3101 are the same as ‘C58C1RifR
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