柱式miRNA PAGE胶回收试剂盒

【求助】天跟胶回收试剂盒老是回收不成功

江janice 求助：用的是天根 的胶回收试剂盒，11管PCR产物，差不多500微升的总体积，上四个孔电泳，电泳后用天根的盒子回收到四个EP管，每管40微升，取5微升电泳，居然没有成功，又取10微升电泳还是没有任何条带，不知道可否有人用天根的盒子，是否遇到这方面的问题，一般100微升的PCR产物，回收到多少体积比较恰当，纠结啊，回收了好几次电泳都没有目的条带，盒子是刚买的新盒子，谢谢好心人帮助 大鹏鸟 天根的盒子还是很好

你的 SSR PAGE 胶为啥扩不出条带？ | 实验时间

频率。我们的 SSR 有很多优点呀，比如在真核生物基因组中分布较为广泛（植物中平均每 20~30 Kb 就会出现一个SSR）、可以轻松鉴别纯合子杂合子（微卫星共显性遗传）、所需 DNA 量较少（单位以 ng/ul 计）、成本较低等。我们实验室即是采用图位克隆的方法，对模式生物——水稻进行基因定位与克隆的。我们分离 PCR 产物用的是 8% 的丙烯酰胺凝胶电泳，一直效果不错，新生刚来的时候，就是从学习提水稻 DNA、扩 PCR、跑 SSR PAGE 胶（俗称「跑槽」，233333）开始进行基因的图位克隆的。理想

SDS-PAGE胶的干燥

 凝胶干燥时遇到的主要问题是凝胶的变形和破裂。将凝胶放在Whatman 3MM滤纸上可防止干燥凝胶变形，但凝胶是否破裂取决于凝胶的厚度和干燥器的质量，因此，应尽量使用薄胶并使凝胶干燥器处于良好状态，使其真空压力波动极少。 (1)试剂与配制：固定液：冰醋酸:甲醇:水（10:20:70） (2)电泳后的凝胶用5～10倍体积固定液在室温下固定，酸性固定液扩散后可使凝胶中的溴酚蓝变黄。蓝色全部消失后，继续固定5min。为防止凝胶破裂，在进行步骤(2)之前可将凝胶浸泡于含20%甲醇、30%甘油的溶液