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- 中国
- 2025年11月21日
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再康生物
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文献和实验频率。我们的 SSR 有很多优点呀，比如在真核生物基因组中分布较为广泛（植物中平均每 20~30 Kb 就会出现一个SSR）、可以轻松鉴别纯合子杂合子（微卫星共显性遗传）、所需 DNA 量较少（单位以 ng/ul 计）、成本较低等。我们实验室即是采用图位克隆的方法，对模式生物——水稻进行基因定位与克隆的。我们分离 PCR 产物用的是 8% 的丙烯酰胺凝胶电泳，一直效果不错，新生刚来的时候，就是从学习提水稻 DNA、扩 PCR、跑 SSR PAGE 胶（俗称「跑槽」，233333）开始进行基因的图位克隆的。理想
凝胶干燥时遇到的主要问题是凝胶的变形和破裂。将凝胶放在Whatman 3MM滤纸上可防止干燥凝胶变形，但凝胶是否破裂取决于凝胶的厚度和干燥器的质量，因此，应尽量使用薄胶并使凝胶干燥器处于良好状态，使其真空压力波动极少。 (1)试剂与配制：固定液：冰醋酸:甲醇:水（10:20:70） (2)电泳后的凝胶用5～10倍体积固定液在室温下固定，酸性固定液扩散后可使凝胶中的溴酚蓝变黄。蓝色全部消失后，继续固定5min。为防止凝胶破裂，在进行步骤(2)之前可将凝胶浸泡于含20%甲醇、30%甘油的溶液
一. 实验原理： SDS-PAGE是对蛋白质进行量化，比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的。 SDS是一种去垢剂，可与蛋白质的疏水部分相结合，破坏其折叠结构，并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。SDS蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。在样品介质和凝胶中加入强还原剂和去污剂后，电荷因素可被忽略。蛋白亚基的迁移率取决于亚基分子量。 二. 试剂和器材： 试剂：1. 5x样品缓冲液（10ml）：0.6ml 1mol/L
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