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- SIGMA-ALDRICH/Amresco
- ZK-0089820
- 美国/中国
- 2025年11月20日
企业认证
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- 文献和实验
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- 库存：
大量
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海再康
- 保存条件：
常温、冷藏
- 规格：
mg/g/ml
再康对照品/标准品特色优势：
• 高效稳定的专利纯化技术 - 高速逆流色谱技术的运用
• 特有的高速逆流色谱对照品研发中心及生产中心，保证对照品的质量可控性及批量生产的稳定性
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文献和实验步骤如下： （1）将切片漂浮于能经受高压灭菌的器皿中。0.1mol/l PBS pH7.2冲洗3×5min。 （2）0.1mol/L甘氨酸PBS冲洗5min。 （3）0.4% Triton X-100 PBS 15min。 （4）1μg./ml 蛋白酶 K（0.1mol/l Tris –HCl pH8.0, 50mmol/L
μg/ml）37℃保温30min。 （12）1×SSC和0.5×SSc 37℃分别冲洗30min。 （13）0.05mol/l PBS冲洗3×5min。 （14）0.5%H2O2 PBS室温20min。 （15）0.05mol/l PBS 冲洗2×5min。 （16）碱性磷酸酶标记抗地高辛抗体（Fab）与抗蛋白或多肽等抗体混合液，前者一般1：1000稀释，后者则因抗体而异。稀释液：1%BSA，0.4%Triton X-100 ,0.05mol/L
：蛋白质样本和生物素标记的蛋白marker标准经SDS-PAGE后转于印迹膜上，然后经一抗→HRP 标记的二抗→HRP催化LumiGLO试剂发生反应并产生荧光→显影于X-光片上。其基本原理如下图： 3.1 主要试剂配制 10×转移缓冲液(transfer buffer)：30.3 gTris-Base，144.1 g Glycine，500 ml三蒸水，振荡混匀后，定容至1000 ml，4℃备用。用时用0.1 M磷酸缓冲液即1×PBS和甲醇稀释至1倍，使甲醇的终浓度
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