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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
Modified Safranine O-Fast Green FCF Cartilage Stain Kit
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海再康生物科技有限公司
- 保存条件:
常温
- 规格:
5×50mL;5×100mL
改良番红O-固绿软骨染色液 Modified Safranine O-Fast Green FCF Cartilage Stain Kit
产品简介
软骨组织由软骨细胞和软骨基质组成,软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。软骨染色方法有很多种,例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。
改良番红O-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色,嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色,与呈现红色的软骨对比鲜明,从而将软骨组织与骨组织区分开。番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料,其显示软骨是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团(硫酸软骨素或硫酸角质素)结合。番红O着色与阴离子的浓度近似成正比关系,间接反映基质中蛋白多糖的含量和分布。当软骨受到损伤时,软骨中的糖蛋白会释放出来,使基质成分分布不均匀,从而导致番红O淡染或不着色。通过图像分析软件可对番红O染色的软骨基质进行定量分析,固绿与胶原纤维结合,不宜褪色,番红O-固绿染色的分化很关键,分化过度易导致切片不着色,分化不足易导致切片着色过深。
自备材料:10%福尔马林固定液,脱钙液,蒸馏水,系列乙醇。
操作步骤(仅供参考):
1、 标本的处理:10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。
2、 常规脱蜡至水。
3、 入新鲜配制的 Weigert 染液染色 3-5min,水洗。
4、 酸性分化液分化 15s。
5、 蒸馏水洗 10min。
6、 在固绿染色液内浸染 5min。
7、 快速用弱酸溶液洗涤切片 10-15s,以便去除残留的固绿。
8、 入 Safranin O stain 内浸染 5min。
9、 分别用 95%乙醇、无水乙醇脱水。
10、二甲苯透明,光学树脂封固。
染色结果
软骨基质>>深红色
软骨细胞核>>蓝色
细胞浆、肌肉、胶原纤维及骨组织呈>>灰绿色
软骨细胞浆>>红色
细胞核>>灰黑色
注意事项
1、需要显示细胞核时,尽量采用铁苏木素染色,其着色力强色调浓,一般的苏木素着色力不强。
2、Weigert 染液不可预先配制后放置,配制好后一般 24h 后失去染色力。
3、切片在 Safranin O stain 中染色不宜过长,否则易导致背景的深红色不易分化掉。
4、切片分化时间应恰当,以背景呈绿色为宜。
5、Safranin O stain 染色后,不宜在低浓度乙醇脱水,否则易褪色。
6、95%乙醇脱水时间不宜过长。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品简介
软骨组织由软骨细胞和软骨基质组成,软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。软骨染色方法有很多种,例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。
改良番红O-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色,嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色,与呈现红色的软骨对比鲜明,从而将软骨组织与骨组织区分开。番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料,其显示软骨是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团(硫酸软骨素或硫酸角质素)结合。番红O着色与阴离子的浓度近似成正比关系,间接反映基质中蛋白多糖的含量和分布。当软骨受到损伤时,软骨中的糖蛋白会释放出来,使基质成分分布不均匀,从而导致番红O淡染或不着色。通过图像分析软件可对番红O染色的软骨基质进行定量分析,固绿与胶原纤维结合,不宜褪色,番红O-固绿染色的分化很关键,分化过度易导致切片不着色,分化不足易导致切片着色过深。
| Components | 5×50mL | 5×100mL | Storage |
| A1: Weigert A液 | 25mL | 50mL | RT避光 |
| A2: Weigert B液 | 25mL | 50mL | RT |
| 取 A1、A2等量混合即为 Weigert染液, 24h后失去染色力,不宜预先配制。 | |||
| 试剂(B):酸性乙醇分化液 | 50mL | 100mL | RT |
| 试剂(C):固绿染色液 | 50mL | 100mL | RT避光 |
| 试剂(D): Safranin O stain | 50mL | 100mL | RT避光 |
| 试剂(E):乙酸溶液 | 50mL | 100mL | RT |
自备材料:10%福尔马林固定液,脱钙液,蒸馏水,系列乙醇。
操作步骤(仅供参考):
1、 标本的处理:10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。
2、 常规脱蜡至水。
3、 入新鲜配制的 Weigert 染液染色 3-5min,水洗。
4、 酸性分化液分化 15s。
5、 蒸馏水洗 10min。
6、 在固绿染色液内浸染 5min。
7、 快速用弱酸溶液洗涤切片 10-15s,以便去除残留的固绿。
8、 入 Safranin O stain 内浸染 5min。
9、 分别用 95%乙醇、无水乙醇脱水。
10、二甲苯透明,光学树脂封固。
染色结果
软骨基质>>深红色
软骨细胞核>>蓝色
细胞浆、肌肉、胶原纤维及骨组织呈>>灰绿色
软骨细胞浆>>红色
细胞核>>灰黑色
注意事项
1、需要显示细胞核时,尽量采用铁苏木素染色,其着色力强色调浓,一般的苏木素着色力不强。
2、Weigert 染液不可预先配制后放置,配制好后一般 24h 后失去染色力。
3、切片在 Safranin O stain 中染色不宜过长,否则易导致背景的深红色不易分化掉。
4、切片分化时间应恰当,以背景呈绿色为宜。
5、Safranin O stain 染色后,不宜在低浓度乙醇脱水,否则易褪色。
6、95%乙醇脱水时间不宜过长。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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