Cell Counting Kit（CCK8）CCK-8/W

Cell Counting Kit（CCK8）CCK-8/WST-8试剂盒检测原理：
◆ Cell Counting Kit简称CCK8,(CCK-8/WST-8)试剂盒，是一种基于WST-8（化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。
◆ WST-8属于MTT的升级产品，工作原理为：在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物（formazan）。颜色的深浅与细胞的增殖成正比，与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值，间接反映活细胞数量。
◆ CCK法应用非常广泛，如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。
锚点CCK方法的优势：
Cell Counting Kit（CCK8）CCK-8/WST-8试剂盒◆ 表1 CCK法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较
检测方法 MTT法 XTT法 WST-1法 CCK法
甲臜产物的水溶性 差（需加有机溶剂溶解再检测） 好 好 好
产品性状 粉末 2瓶溶液 溶液 1瓶溶液
使用方法 配成溶液后使用 现配现用 即开即用 即开即用
检测灵敏度 高 很高 很高 高
检测时间 较长 较短 较短 最短
检测波长 560-600nm 420-480nm 420-480nm 430-490nm
细胞毒性 高，细胞形态完全消失 很低，细胞形态不变 很低，细胞形态不变 很低，细胞形态不变
试剂稳定性 一般 较差 一般 很好
批量样品检测 可以 非常适合 非常适合 非常适合
便捷程度 一般 便捷 便捷 非常便捷

◆ 酚红和血清对CCK法的检测不会造成干扰；
Cell Counting Kit（CCK8）CCK-8/WST-8试剂盒◆ 细胞毒性非常低，因此加入WST-8显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到最佳测定时间。
CCK法的操作步骤（更多内容请见 说 明 书 ）：
实验一：细胞活性检测
1、在96孔板中接种细胞悬液（100μL/孔）。将培养板放在培养箱中预培养（37℃,5% CO2）。
2、向每孔加入10 μL CCK溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。
3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
5、若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。
实验二：细胞增殖-毒性检测
1、在96孔板中配置100μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时（37℃，5% CO2）。
2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。
3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间（例如：6、12、24或48小时）。
4、向每孔加入10μL CCK溶液（注意不要再孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。
5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
6、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
7、若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。
注意：如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。
活力计算：
细胞活力*（％）=[A(加药)-A（空白）]/[A（0加药）-A（空白）] ×100
A（加药）：具有细胞、CCK溶液和药物溶液的孔的吸光度
A（空白）：具有培养基和CCK溶液而没有细胞的孔的吸光度
A（0加药）：具有细胞、CCK溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
*细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力
保存条件：
4℃避光保存一年有效，-20℃避光保存两年有效。
Cell Counting Kit（CCK8）CCK-8/WST-8试剂盒
zk1403 STEMium-ACF 人类多能干细胞培养基-无动物组分 STEMium. Human Pluripotent Stem Cell Growth Medium-animal component free 500ml ATCC
zk1404 MSCM-acf 间充质干细胞培养基 Mesenchymal Stem Cell Medium-animal component free 500 ml ATCC
zk1405 ATCC
zk1406 ATCC
zk1407 MEM MEM MEM with Earle's Salts and L-Glutamine 500 ml ATCC
zk1408 MEM MEM MEM with Hank's Salts and L-Glutamine 500 ml ATCC
zk1409 MEM MEM MEM with Eagles's Salts and Glutamine 500 ml ATCC
zk1410 M199E M199E Medium 199 with Earle's Salts and L-Glutamine 500 ml ATCC
zk1411 M199H M199H Medium 199 with Hanks Salts and L-Glutamine 500 ml ATCC
zk1412 DMEM DMEM DMEM with L-Glutamine and Sodium Pyruvate 500 ml ATCC
zk1413 DMEM DMEM DMEM with High-Glucose - L-Glutamine and Sodium Pyruvate 500 ml ATCC
zk1414 DMEM DMEM DMEM with High-Glucose - L-Glutamine and Sodium Pyruvate 1L ATCC
zk1415 DMEM DMEM DMEM with L-Glutamine - Sodium Pyruvate and 25 mM HEPES 500 ml ATCC
zk1416 DMEM DMEM DMEM with High-Glucose - L-Glutamine - Sodium Pyruvate and 25 mM HEPES 500 ml ATCC
zk1417 DMEM-prf DMEM-prf DMEM with High Glucose - L-Glutamine and Sodium Pyruvate - phenol red-free 1L ATCC
zk1418 Ham's F-10 Ham's F-10 F-10 with L-Glutamine and 25 mM HEPES 500 ml ATCC
zk1419 Ham's F-12 Ham's F-12 F-12 with L-Glutamine and 25 mM HEPES 500 ml ATCC
zk1420 DMEM/F-12 DMEM/F-12 DMEM/F-12 with L-Glutamine 500 ml ATCC
zk1421 DMEM/F-12 DMEM/F-12 DMEM/F-12 with L-Glutamine and 15 mM HEPES 500 ml ATCC
zk1422 RPMI 1640 RPMI 1640 RPMI 1640 without L-Glutamine - with 25 mM HEPES 500 ml ATCC
zk1423 RPMI 1640 RPMI 1640 RPMI 1640 with L-Glutamine and 25 mM HEPES 500 ml ATCC
zk1424 IMDM IMDM MDM with L-Glutamine and 25 mM HEPES; without alpha-Thioglycerol - 2-mercaptoethanol 500 ml ATCC
zk1425
zk1426
zk1427
zk1428
zk1429
zk1430 rhSCF 重组人干细胞因子 Recombinant Human Stem Cell Factor 2μg
zk1431 rhG-CSF 重组人粒细胞集落刺激因子 Recombinant Human Granulocyte Colony Stimulating Factor 2μg
zk1432 rhGM-CSF 重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 Recombinant Human Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor 5μg
zk1433 rhM-CSF 重组人巨噬细胞集落刺激因子 Recombinant Human Macrophage Colony Stimulating Factor 2μg
zk1434 rhTNF-α 重组人肿瘤坏死因子-α Recombinant Human Tumor Necrosis Factor-alpha 10μg
zk1435 rhTNF-α-His 重组人肿瘤坏死因子-α,His Recombinant Human Tumor Necrosis Factor-alpha,His 10μg
zk1436 rhTNF-α Vari 重组人肿瘤坏死因子-αVariant Recombinant Human Tumor Necrosis Factor- alpha Variant 10μg