Stemgent® Oct4-neo MEF (P2)

产品简介：对于Stemgent® Oct4-neo MEF (P2)培养防止污染的措施等注意事项，相信各位培养细胞老师都知道的差不多，其实实际情况也就是那些步骤了，主要就是在于各位操作的娴熟程度了。所以这个预防还是在于大家的锻炼。
对于贴壁生长的Stemgent® Oct4-neo MEF (P2)，相对来说比较简单但很麻烦。以下我主要讨论贴壁生长的Stemgent® Oct4-neo MEF (P2)。
在讨论之前，大家首先要有一个概念，即洁净区，并不是没有细菌，而是细菌的数量非常少，国家标准100级的洁净标准是浮游菌数不得超过5个每立方米，沉降菌数不得超过1个每培养皿.而国外的标准比我国的还要高一点，要求的数量更少。
所以在我们的洁净操作台里，并不是真正一个细菌都没有的，所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌的数量。
处理方法如下：
1）.将污染的Stemgent® Oct4-neo MEF (P2)培养液倒掉，转烧瓶口，加入10mlPBS，适当晃动清洗培养瓶，然后倒掉。转烧瓶口。
2）.继续加入10mlPBS，同样方法晃动，清洗培养瓶，然后倒掉。
3）.继续加入5mlPBS，同样方法洗瓶，主要是培养面，然后倒掉。
4）.重复步骤3再洗。
5）.重复步骤3再洗。
6）.加入3-5ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
7）.加入3ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
8）.再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。
9）.加入10ml培养液，加入2ml双抗，将换好新的培养液Stemgent® Oct4-neo MEF (P2)放置培养箱培养，5小时之后，倒掉培养基，加入PBS洗瓶两次，然后加入胰酶消化，吹打后置于离心机800-1000r/min离心，然后洗一次。置于新的培养瓶里培养，培养体系加入2ml双抗。
10）.24h之后，视情况换液，若仍然污染严重，培养基浑浊，重复以上步骤，若看不到污染物，则继续步骤1)、3）、4）、6）、8），然后加入培养液培养Stemgent® Oct4-neo MEF (P2)，培养体系加入2ml双抗.
11).24h之后，若仍污染严重，可再重复一次，若还污染只能弃之（不过一般没有出现这种情况），若镜下不见污染物，则换液PBS洗瓶，正常培养。
以上是对于细菌污染（常见为金 黄 色 葡 萄 球 菌和大肠杆菌）；若为霉菌或者真菌污染，加入两性霉素B清洗和培养，终浓度一般为2.5μg/ml（在30μg/ml时会有细胞毒性）。另外也可以选择在Stemgent® Oct4-neo MEF (P2)培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放 线 菌 素D。其它操作同；预防为主！！所以处理细菌污染的重要原则就是：无限地稀释细菌的浓度，无限地减少细菌的数量！尤其注意血清的质量！这个是主要来源。一般建议用北美血清。
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以上方法主要是针对贴壁生长的Stemgent® Oct4-neo MEF (P2)，在操作的过程中，一定要小心操作动作，轻柔缓慢，切忌大动作鲁莽。防止Stemgent® Oct4-neo MEF (P2)脱落。
�}le�� > o-bidi-font-family:Helvetica;color:black;background:#F2F1FA'>稳转报告细胞株同类产品推荐：zkB062Hu 70kDa热休克蛋白1样蛋白(HSPA1L)检测试剂盒 检测范围
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zkA615Hu 纤溶抑制因子(TAFI)检测试剂盒 检测范围
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AEA527Hu 抗氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)检测试剂盒 检测范围
zkA618Hu 速激肽受体2(TACR2)检测试剂盒 检测范围
zkA620Hu 解整合素金属蛋白酶8(ADAM8)检测试剂盒 检测范围
zkA784Hu 淀粉酶β(Amyβ)检测试剂盒 检测范围
zkA782Hu 碳 酸 酐酶Ⅱ(CA2)检测试剂盒 检测范围
zkA780Hu 乳铁传递蛋白(LTF)检测试剂盒 检测范围
zkA624Hu 肝癌源性生长因子(HDGF)检测试剂盒 检测范围
zkA181Hu 中性粒细胞弹性蛋白酶(ELA2)检测试剂盒 检测范围
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zkA770Hu 胱天蛋白酶5(CASP5)检测试剂盒 检测范围
zkA771Hu 趋化因子C-X-C-基元配体16(CXCL16)检测试剂盒 检测范围
zkA630Hu 糖原合酶激酶3α(GSK3α)检测试剂盒 检测范围
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zkA775Hu 己糖激酶1(HK1)检测试剂盒 检测范围
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zkA609Hu 谷胱甘肽S转移酶α1(GSTα1)检测试剂盒 检测范围
zkB956Hu 谷胱甘肽S转移酶α5(GSTα5)检测试剂盒 检测范围
zkA721Hu C-型钠尿肽(CNP)检测试剂盒 检测范围
以上方法主要是针对贴壁生长的NF-kB/SEAP Stable Reporter Cell Line /NF-kB/SEAP稳转报告细胞株，在操作的过程中，一定要小心操作动作，轻柔缓慢，切忌大动作鲁莽。防止NF-kB/SEAP Stable Reporter Cell Line /NF-kB/SEAP稳转报告细胞株脱落。