MiniProGel™蛋白制胶、电泳与转膜系统(4胶/4膜)

免疫印迹实验相关原理介绍

免疫印迹(Western blot)简介和原理 免疫印迹用于鉴定能够与特异性抗体相互作用的大分子抗原（一般为蛋白质）并测定抗原的大小。蛋白质首先通过 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，再通过电泳转移到固相支持物上，固相支持物包括硝酸纤维素膜，聚偏乙烯二氟（PVDF）膜和阳离子尼龙膜等。首先把膜上未反应的位点封闭起来以抑制抗体的非特异性吸附，这样固定的蛋白即可与特异性的多克隆或单克隆抗体相互作用。最后通过放射，生色或化学发光的方法进行定位。 实验常规试剂 1.0 mol/L Tris•HCl

BIO-RAD（伯乐）电泳仪、电泳槽

使用者最大凝胶尺寸(W x L) 24 x 16 cm缓冲液要求200 ml凝胶容量≤3 块PROTEAN® II 凝胶三明治*3 块Criterion™ 凝胶4 块Mini-PROTEAN® 3 凝胶4 块Ready Gel® 预制胶 电源PowerPac™ HC 电源简介： 体积(W x L x H) 37 x 24 x 11 cm Sequi-Gen GT 测序电泳槽简介: 拥有专利* Sequi-Gen GT 测序电泳槽使测序胶的铺制和电泳变得更简单。系统设计避免

Western blot 实验技巧精要

接下来为大家介绍一些 WB电泳部分的注意事项。 1. 制胶 小编建议大家直接用制胶试剂盒，价格不贵，质量不错。如果自己配置母液，就请注意 pH 值。 制胶部分最重要的是在配浓缩胶前不要着急将分离胶上面的水弃掉，先配好浓缩胶，在加 TEMED 之前再弃掉水。小编虽然没有亲自试过，但是如果弃掉水后 5 分钟之内还没有加上浓缩胶，这块胶最好还是不要用了。 2. 上样 小编的经验是上样的总蛋白量一般是 20-70ug，这个要根据检测蛋白的含量而定，需要摸索