MTT 噻唑兰

注意事项
1) 溶解甲臜的有机溶剂具有毒性，使用时注意防护。
2) MTT有致癌性，应小心操作；MTT溶液需要无菌，因其对菌很敏感。MTT溶液不可4℃保存超过1周，因其可能发生降解，导致检测结果错误。
3) MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力，但不能测定细胞绝对数。在用酶标仪检测结果的时候，为了保证实验结果的线性，MTT吸光度最好在0-0.7范围内。
4) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法（以96孔板为例）
细胞生长的培养条件会影响检测检测，因此进行MTT检测时需考虑这些条件，包括：培养时间，传代次数以及生长培养基的成分等。一般情况，48-72h培养时间下，最初铺板的细胞密度可控制在5000-10,000/孔。
注：最终检测的培养液内含有酚红会严重影响检测结果。推荐MTT检测时细胞培养在无酚红环境下。也可以在进行MTT孵育的时候改用无酚红培养液。
A．工作液配制
1） MTT溶液
生化研究中，常配制成5mg/mL的储备液。MTT最好现配现用，可以称取MTT 0.5g，溶于100 mL的磷酸缓冲液（PBS）或无酚红的培养基中，用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌，4℃ 避光短时间保存。建议小剂量分装放到-20℃长期保存，避免反复冻融。
2） SDS-HCl溶液（MTT终止液）
取10ml 0.01 M HCl加入1g SDS，颠倒混匀或者超声使其完全溶解，此时即为终止液。建议现配现用。
B．MTT细胞增殖检测
1） 接种细胞：用含10%胎牛血清（FBS）的培养液配制成单个细胞悬液，调整细胞密度，以每孔5000-10, 000个细胞接种到96孔板，每孔体积100µl，培养板的边缘孔用无菌PBS填充。设置空白对照孔（不含有细胞）。
2） 37℃，5% CO₂，培养24-72h。
3） 可选：对于贴壁细胞，去除旧的培养液，更换100µl/孔新鲜的培养液（不含酚红）；对于悬浮细胞，离心96孔板，去除尽可能多的上清液。然后加入 100µl/孔新鲜的培养液（不含酚红）重悬细胞；
4） 每孔加入10µl MTT溶液（5 mg/ml），加样时尽量勤换枪头，控制加量误差。
5） 水平摇床上低速混匀1 min后，放入37℃培养箱孵育4h。注：对于高密度的细胞（>100,000 cells/孔）可缩短孵育时间至2h。
6） 对于贴壁细胞，直接吸掉旧的培养液，避免枪尖刮破单细胞层。对于悬浮细胞，离心收集细胞，去除培养液。
7） 加入100µl/孔SDS-HCl溶液，用枪充分混匀后放入37℃培养箱孵育4 h。注：更长的孵育时间会降低检测灵敏度。
8） 孵育结束，放置在酶标仪上摇匀后，选择570nm，测定吸光度。记录结果，比色以空白调零。
注：对于细胞毒性检测，以未经药物处理细胞的OD值为100%，然后计算药物处理细胞所占的比率（x），公式如下：OD（未处理细胞）/OD（药物处理细胞）=100%/x。然后建立直方图。
MTT 噻唑兰
zk1337 NPCDM 神经前体细胞分化培养基 Neural Precursor Cell Differentiation Medium 500 ml ATCC
zk1338 OM 少突胶质细胞培养基 Oligodendrocyte Medium 500 ml ATCC
zk1339 OPCDM 少突胶质前体细胞分化培培养基 Oligodendrocyte Precursor Cell Differentiation Medium 500 ml ATCC
zk1340 SCM 雪旺细胞培养基 Schwann Cell Medium 500 ml ATCC
zk1341 AM 星形胶质细胞培养基 Astrocyte Medium 500 ml ATCC
zk1342 ACM 星形胶质细胞培养基 Astrocyte Conditioned Medium 100ml ATCC
zk1343 AM-a 星形胶质细胞培养基-动物 Astrocyte Medium-animal 500 ml ATCC
zk1344 MM 小胶质细胞培养基 Microglia Medium 500 ml ATCC
zk1345 MaM 巨噬细胞的培养基 Macrophage Medium 500 ml ATCC
zk1346 MelM 黑色素细胞培养基 Melanocyte Medium 500 ml ATCC
zk1347 MelM-2 黑色素细胞培养基-2 Melanocyte Medium-2 500 ml ATCC
zk1348 FM 成纤维细胞培养基 Fibroblast Medium 500 ml ATCC
zk1349 FM-2 成纤维细胞培养基-2 Fibroblast Medium-2 500 ml ATCC
zk1350 AEpiCM 肺泡上皮细胞培养基 Alveolar Epithelial Cell Medium 500 ml ATCC
zk1351 SkMCM 骨骼肌细胞培养基 Skeletal Muscle Cell Medium 500 ml ATCC
zk1352 EpiCM 上皮细胞培养基 Epithelial Cell Medium 500 ml ATCC
zk1353 EpiCM-a 动物上皮细胞培养基 Epithelial Cell Medium-animal 500 ml ATCC
zk1354 MCM 肾系膜细胞培养基 Mesangial Cell Medium 500 ml ATCC
zk1355 ObM 成骨细胞培养基 Osteoblast Medium 500 ml ATCC
zk1356 CM 软骨细胞培养基 Chondrocyte Medium 500 ml ATCC
zk1357 SM 滑膜细胞培养基 Synoviocyte Medium 500 ml ATCC
zk1358 NPCM 髓核细胞培养基 Nucleus Pulposus Cell Medium 500 ml ATCC
zk1359 HM 肝细胞培养基 Hepatocyte Medium 500 ml ATCC
zk1360 SteCM 星形细胞培养基 Stellate Cell Medium 500 ml ATCC
zk1361 CMM 心肌细胞培养基 Cardiac Myocyte Medium 500 ml ATCC
zk1362 TMCM 小梁网细胞培养基 "Trabecular Meshwork Cell Medium
" 500 ml ATCC
zk1363 TM 滋养层细胞培养基 Trophoblast Medium 500 ml ATCC
zk1364 AdM 脂肪细胞培养基 Adipocyte Medium 500ml ATCC
zk1365 PAM 前脂肪细胞培养基 Preadipocyte Medium 500 ml ATCC
zk1366 PADM 脂肪细胞诱导分化培养基 Preadipocyte Differentiation Medium 500 ml ATCC
zk1367 MSCM 间充质干细胞培养基 Mesenchymal Stem Cell Medium 500 ml ATCC
zk1368 MODM-500 间充质干细胞-成骨细胞分化培养基 Mesenchymal Stem Cell Oseogenic Differentiation Medium 500 ml ATCC
zk1369 MODM-250 Mesenchymal Stem Cell Oseogenic Differentiation Medium 250 ml ATCC