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1
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上海再康
- 英文名:
Recombinant Protein G
Recombinant Protein G计数:培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,Recombinant Protein G所以要进行细胞计数,计数结果以每毫升细胞数表示,细胞计数的原理和方法怀与血细胞计数相同,血细胞计数器;手工计数细胞,COUI TER计数仪;人工计数。
1.当细胞铺满整个平皿(100mm)后,吸弃旧培养液,10mLPBS洗一遍
2.0.25%胰酶(预热20分钟左右)2ml消化,轻轻摇晃,Recombinant Protein G直至肉眼见单层细胞呈块状脱落(或在显微镜下观察细胞之间分离),立刻加5ml(DMEM+10%FBS)终止消化,轻柔吹打8-10次成单细胞。
3.离心1000rpm*5min,弃上清,加DMEM+10%FBS轻柔吹打。
4.将细胞悬液1:4传到100mm细胞培养皿中,每个皿加10ml(DMEM+10%FBS)培养液,正常情况下2-3天就可以长满,期间不用换液。
Recombinant Protein G的传代方法:首先在倒置显微镜下观察生长融合达80%,不需要长满,就准备传代。倒掉旧的培养基,再用已经高压灭菌过的PBS洗1-2次,我用的是25平方厘米的培养瓶,加入1毫升已经配制好的0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA(0.25%胰蛋白酶是用D-Hanks配制后先用滤纸过滤,再用一次性过滤器过滤除菌,Recombinant Protein G再分装成1ml的小包装,刚好每次用完一个,避免每次反复冻存,会使胰酶的活性下降),加入的量以刚好盖满瓶底为宜。放到倒置显微镜下观察变化,一旦发现细胞开始变园收缩,大约1-3分钟时间,必要时可以吹打帮助细胞分散,就立即加入培养基中和胰酶,如有EDTA最好要离心(800rpm,5min),弃上清夜,Recombinant Protein G再加入完全培养基吹匀,再分瓶,一般一瓶可以分2-3瓶。放入5%的CO2培养箱,37度培养24小时后观察。
zk-E10230 神经激肽B(NKB)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10231 强啡肽(Dyn)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10232 脑啡肽(ENK)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10233 γ肽(Pγ)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10234 C型钠尿肽(CNP)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10235 阿立新A(Orexin A)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10236 神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10237 脑肠肽(BGP/Gehrelin)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10238 乙酰胆碱(ACH)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10239 脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10240 细胞角蛋白20(CK20)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10241 N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10242 前心钠肽(Pro-ANP)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10243 细胞角蛋白13(CK-13)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10244 细胞角蛋白17(CK17)ELISA试剂盒 检测范围
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zk-E10246 B细胞淋巴瘤因子3(Bcl3)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10247 癌蛋白诱导转录物3(OIT3)ELISA试剂盒 检测范围
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zk-E10251 大肠癌专一抗原2(CCSA-2)ELISA试剂盒 检测范围
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zk-E10254 肠三叶因子(ITF)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10255 Dickkopf 1(DKK1)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10256 激肽释放酶11(KLK 11)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10257 生长调节致癌基因γ/黑素瘤生长刺激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10258 生长调节致癌基因β/黑素瘤生长刺激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10259 美丽线虫凋亡基因(CED-3)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10260 胸腺白血病抗原(TLa)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10261 肿瘤特异性移植抗原(TSTA)ELISA试剂盒 检测范围
zk-E10262 足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA试剂盒 检测范围
1.当细胞铺满整个平皿(100mm)后,吸弃旧培养液,10mLPBS洗一遍
2.0.25%胰酶(预热20分钟左右)2ml消化,轻轻摇晃,Recombinant Protein G直至肉眼见单层细胞呈块状脱落(或在显微镜下观察细胞之间分离),立刻加5ml(DMEM+10%FBS)终止消化,轻柔吹打8-10次成单细胞。
3.离心1000rpm*5min,弃上清,加DMEM+10%FBS轻柔吹打。
4.将细胞悬液1:4传到100mm细胞培养皿中,每个皿加10ml(DMEM+10%FBS)培养液,正常情况下2-3天就可以长满,期间不用换液。
Recombinant Protein G的传代方法:首先在倒置显微镜下观察生长融合达80%,不需要长满,就准备传代。倒掉旧的培养基,再用已经高压灭菌过的PBS洗1-2次,我用的是25平方厘米的培养瓶,加入1毫升已经配制好的0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA(0.25%胰蛋白酶是用D-Hanks配制后先用滤纸过滤,再用一次性过滤器过滤除菌,Recombinant Protein G再分装成1ml的小包装,刚好每次用完一个,避免每次反复冻存,会使胰酶的活性下降),加入的量以刚好盖满瓶底为宜。放到倒置显微镜下观察变化,一旦发现细胞开始变园收缩,大约1-3分钟时间,必要时可以吹打帮助细胞分散,就立即加入培养基中和胰酶,如有EDTA最好要离心(800rpm,5min),弃上清夜,Recombinant Protein G再加入完全培养基吹匀,再分瓶,一般一瓶可以分2-3瓶。放入5%的CO2培养箱,37度培养24小时后观察。
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